长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析.pdfVIP

安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui 2014Sep；49(9) ·1283 · 长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析 张 勋 ，程文明 ，李春如 ，吴 昆 ，陆维丽 ，李 俊 摘要 建立高效液相色谱法同时测定长座虫草中13种核苷 长座虫草 (Ophiocordycepslongissima)是寄生于 和碱基类物质 ，色谱条件为：TSKgelODS—IOOV色谱柱 (250 同翅 目蝉若虫上的一种重要的虫生真菌，1963年， mm×4．6mill，5Ixm)，以甲醇 一0．01mol／LKH2PO4水溶液 首次在 日本发现并命名。1999年，李春如 等 在 系统为流动相，梯度洗脱 ，流速 1mL／min，检测波长260nm， 国内首次采到此虫草，经鉴定，其无性型为长座被毛 柱温20℃。13种成分在 50min内均达到基线分离，线性关 孢Hirsutellalongissima，并成功培育出未成熟的子座 系良好 (r≥0．9990，n=8)；平均回收率在98．4％～107．5％ 和孢梗束。目前有关长座虫草的研究尚集中在生态 (RSD2．O％，n=5)。结果表明长座虫草子实体中胞嘧啶、 次黄嘌呤含量相对较高；菌丝体中尿嘧啶、鸟苷、腺苷含量较 学和培养方法方面 J，对化学成分研究少见报道。 高，尿苷在菌丝体和子实体中含量均较高。 虫草含有多种有效成分，包括核苷、多糖、甾醇、肽 关键词 长座虫草；高效液相色谱 ；核苷；碱基；提取；含量测 类、有机酸等，具有抗肿瘤、抗氧化抗炎、神经系统、 定 心血管系统、免疫调节等多种药理作用 J。核苷 中图分类号 R284．1；R931．6 类物质为虫草中主要活性成分之一，其检测方法主 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2014)09—1283—04 要有高效液相色谱法 (highperformanceliquidchro- matography，HPLC)、毛细管电泳法、薄层色谱扫描法 2014—05—29接收 等_6-7]。HPLC法为最常见的核苷测定方法，但采 基金项 目：国家 自然科学基金 (编号；天然药物活性组分 与功 效 国 家 重 点 实 验 室 资 助 项 目 (编 号： 用HPLC对 l3种核苷和碱基 (腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄 SKLNMKF201416)；安徽 省 自然 科 学基 金 (编 号： 嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺苷、鸟苷、胞苷、 090413105) 尿苷、B．胸苷、肌苷、虫草素)同时测定尚属首次。 作者单位 ：安徽医科大学药学院，安徽天然药物活性研究省级重点 该研究对长座虫草子实体及菌丝体中13种核苷和 实验室，安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心，合 碱基同时进行分析，为建立和提升长座虫草及其制 肥 23o032 品的质量控制方法提供实验依据。 天然药物活性组分与功效国家重点实验室 (中国药科大 学)，南京 210009 1 材料与方法 安徽农业大学林学院，安徽省微生物防治重点实验室 ，合 肥 230036