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2011．Vol26．1 ·56· 光明中医2011年1月第26卷第1期CJGMCMJanuary 高效液相色谱研究进展 王 昕 摘要：简要介绍高效液相色谱技术的历史发展，对几种常见的高效液相色谱和近期发展起来的一些新型高效液相色谱的研究 进展、应用及前景进行综述。 关键词：高效液相色谱；进展；应用；前景 doi：10．3969／j．issn．1003—8914．201I．01．0032文章编号：1003—8914(2011)-01-0056-03 色谱法是利用混合物中各组分在两相中分配系数 的应用∞]。 不同，当流动相推动样品中的组分通过固定相时，在两 2几种常见高效液相色谱H声’ 相中进行连续反复多次分配，从而形成差速移动，达到 根据分离机制不同，高效液相色谱可分四大基础 分离的方法。根据流动相的状态可分为气相色谱法和 类型：分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、凝胶色谱。 液相色谱法。在液相色谱中，采用颗粒十分细的高效 2．1分配色谱法分配色谱法是四种液相色谱法中 固定相并采用高压泵输送流动相，全部工作通过仪器 应用最广泛的一种。它类似于溶剂萃取，溶质分子在 来完成。这种色谱称为高效液相色谱(high两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们 performanceliquidchromatography，HPLC)。虽然气相的相对溶解度进行分配。一般将分配色谱法分为液液 色谱的应用领域十分广泛，但仍不能解决大量的恢复 色谱和键合相色谱两类。液液色谱的固定相是通过物 性差和热不稳定的化合物的分离难题。经典的液相色 理吸附的方法将液相固定相涂于载体表面。在液液色 谱仍然是用于分析这类化合物的手段。直到20世纪 谱中，为了尽量减少固定相的流失，选择的流动相应与 60年代后期，由于新型柱填料高压输液泵和高灵敏度 固定相的极性差别很大。由此人们将固定相为极性， 检测器的出现，才使液相色谱快速发展起来，并发展成 流动相为非极性的液相色谱称为正相液相色谱；相反 为高效液相色谱…。本文简要介绍高效液相色谱技 的称为反相液相色谱。 术的历史发展，对几种常见的高效液相色谱和近期发 键合相色谱的固定相是通过化学反应将有机分子 展起来的一些新型高效液相色谱的研究进展、应用及 键合在载体或硅胶表面上。目前，键合固定相一般采 前景进行综述。 用硅胶为基体，利用硅胶表面的硅醇基于有机分子之 1 高效液相色谱的历史发展H。 间成键，即可得到各种性能的固定相。一般来说，键合 1903年，俄国植物学家M．S．Tswett发表了题为 的有机基团主要有两类：疏水基团、极性基团。疏水基 “一种新型吸附现象及在生化分析上的应用”的研究 团有不同链长的烷烃(C8和C”)和苯基等。极性基团 论文，文中第一次提出了应用吸附原理分离植物色素 有丙胺基、氰乙基、二醇、氨基等。与液液色谱类似，键 的新方法。1906年，他命名这种方法为色谱法。这种合相色谱也分为正相键合相色谱和反相键合相色谱。 简易的分离技术，奠定了传统色谱法基础。高效液相 在分配色谱中，对于固定相和流动相的选择，必须 色谱的发展始于20世纪60年代中后期。60年代末综合考虑溶质、固定相和流动相三者之间分子的作用 科克兰、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人开发了世 力才能获得好的分离。三者之间的相互作用力可用相 界上第一台商效液相色谱仪，开启了高效液相色谱的 对极性来定性地说明。分配色谱主要用于分离分子量 时代。1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的 践》一书，标志着高效液相色谱法正式建立。1975年分