环孢菌素A联合汉防己甲素逆转人白血病耐药细胞株K562／A02细胞多药耐药的分子生物学机制.pdfVIP

lOl0 ±国主耍匡堡盒苤查 塑生 旦笙 鲞箜 塑 !! ! mber2008，Vo1．28N。．It ， 环孢菌素A联合汉防己甲素逆转人 白血病耐药细胞株 K562／A02细胞多药耐药的分子生物学机制 陈宝安 郭晶晶 程 坚 高 峰 丁家华 许文林 沈惠玲 孙新 臣 成红艳 高 冲 孙耘玉 王 骏 ‘赵 刚 宋慧慧 鲍 文 李国宏 刘莉洁 陈文姬 王雪梅 摘要 目的 多药耐药(muhidrugresistance，MDR)是导致肿瘤化疗失败的主要原因， 本研 究探讨环孢 菌素A(cyclosporineA，CsA)及汉防己甲素(tetrandrine，Tet)联合应用对人 白血病耐药细胞株 K562／A02细 胞MDR的逆转作用及其分子生物学机制。方法 K562／A02细胞经 CsA和 Tet作用后，以流式细胞仪 (FCM)检测细胞 内柔红霉素 (daunorubicin，DNR)浓度和 P一糖蛋 白(p-glycoprotein，P-gP)的表达，逆转录聚 合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT—PCR)检测 多药耐药基因 (muhidrugresistance gene，mdr1)mRNA表达水平。结果 K562／A02细胞 内DNR浓度为K562的19％，CsA(1mg／L)及Tet(0．1 mg／L)单独及联合作用K562／A02细胞 48h后细胞 内DNR的浓度分别为 K562的60％、65％、98％ K562 和 K562／A02细胞 P—gP 荧光 强 度 分 别 为 0．18％和 96．51％ ，K562／A02细 胞 经 CsA (1mg／L)和 Tet (0．1mg／L)单独及联合处理后细胞 P—gP荧光强度分别为75．32％，76．86％和48．61％。K562／A02细胞经 过两药单独作用后耐药株 mdrl—mRNA下调微弱，联合用药下调效果明显。结论 环孢菌素 A和汉防己甲 素均可逆转 白血病细胞的耐药，且两药联合作用逆转效果增强，具有协同作用。 关键词 环孢菌素A；汉防己甲素 ；K562／A02细胞 ；多药耐药；P一糖蛋白 BiomolecularM echanismsofCyclosporineA ，Tetrandrine and Their Combination on the Reversion of MultidrugResistanceinHumanLeukemiaCellLineCHENBao—an，GUOJing-jing，CHENGJian，etalDe— partmentofHematology，ZhongdaHospital，SoutheastUniversity，Na ng (210009) Abstract Objective Muhidrugresistance(MDR)playsanimportantroleinthefailureofchemotherapyon malignanttumors．ThisstudywastoinvestigatethebiomolecularmechanismsofcyclosporineA(CsA)，tetrandrine (Tet)andtheircombinationonmuhidrugresistanceincelllineK562／A02．Methods K562／A02cellsweretrea— tedwithCsAand(or)Tet．Theintracellulardaunorubicin (DNR)concentrationandtheexpressionofP—glycopro— rein (P—gP)wereobservedbyflowcytometryassay．ThemRNA expressionofmudtidingresistancegene (mdr1) wasmeasuredbyfluorescentsemi．quantitativereversetranscriptasepolymerasechainreaction(RT—PCR