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与流感病毒复制相关的宿主细胞因子研究 黄文林 (中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学实验室，北京，100101 近年来从亚洲到欧美爆发流行的H5N1型高致病性禽流感病毒除了导致数百亿只鸡死 亡或被捕杀外，还在世界范围内引起人感染和死亡。2009年新型甲型HINl流感病毒则发 生了人H3N2、猪H1N1及禽H5NI的基因重排，表明流感病毒正以惊人的速度发生基因重 排，而这种重排将打破宿主特异性，使人与人及人与动物间传播成为可能。由于流感病毒具 有快传播、易突变、易感宿主复杂等特点，使得以疫苗为基础的防御工作受到挑战。阐明流 感病毒的分子致病机制， 以寻求更好的防治措施是该领域的主要任务之一。 利用细胞中调控病毒复制的因子下调病毒复制，并增强细胞的抗病毒性免疫反应将提高 细胞的抗病毒能力。基于上述观点，项目研究了RNA编辑酶ADARl对H1N1流感病毒的 复制抑制作用，并探讨了病毒非结构蛋白NSl对细胞抗病毒免疫反应的下调机制。 Delta Virus)等病毒的复制，但分子机制不清楚。我 的编辑。ADARI可调控HDV(Hepatitis 们发现将HINl病毒接种至ADARl高表达的细胞，病毒的滴度比对照组低，表明ADARl 可抑制流感病毒在宿主细胞的复制。对病毒基因进行测序没有发现突变，表明ADARl没有 对病毒基因进行编辑，推测ADARI可能通过对细胞内其他双链RNA的编辑，比如microRNA 报告基因的3’非翻译区，发现在ADARI过表达的细胞中带有PBl基因的荧光素酶表达水 平下调，推测PBl基因中存在microRNA的作用靶点。利用软件预测及试验筛选，我们得 接种HINl流感病毒，血凝试验表明3条microRNA序列均能抑制流感病毒复制。目前正在 研究ADARl对microRNA的编辑机制。 非结构蛋白NSl是流感病毒最主要的毒力因子之一，在病毒感染后可下调I型干扰素的 表达，而使病毒逃逸宿主固有性免疫系统的监视。NSI是一个多功能性的蛋白，可能通过与 多个蛋白或蛋白复合体的相互作用来干扰细胞的抗病毒免疫反应。我们利用表达谱芯片筛选 PCR及 其启动子区的NF—KB结合位点有关，表明NSl可能对NF—KB有下调作用。荧光素酶检测系 统进一步证实了NSl对NF—KB的活性抑制。Westernblot结果表明NSl可下调TNFQ活化 的NF—KB入核。蛋白相互作用研究发现NSI可直接与IKKQ及Il(I(B结合。不同于已发表的 NSl可通过PKR通路抑制NF—KB介导其下游基因表达，我们的研究表明在病毒感染后NSl KB 可直接与IKKQ邝结合而抑制下游I Q启动的NF—KB通路，进一步说明了NF—KB通路 在抗病毒免疫反应中的重要作用。 个人简介 黄文林，男，1953年10月生，肿瘤学教授，博士生导师。1994年获普林斯顿大学博士 学者联谊会会长，曾任纽约高等病毒研究所资深科学家，旅美科协及制药协会会长。2001 年夏天回国任中山大学肿瘤防治中心教授，生物治疗中心主任，中心学术委员会委员等职务， 中山大学肿瘤防治中心基因治疗奠基人之一，现为中山大学肿瘤防治中心教职工常设委员会 主任。2006年兼任中国科学院微生物研究所特聘研究员，同年被香港中文大学聘为名誉教 授，同时兼任国家新药评审中心评审专家，2008年获得国务院特殊人才津贴。担任《癌症》 Jounrnal ofChineseClinicalMedicine、 杂志副主编，为Chinese．German Oncology、Jounmal Vaccine、JournalofGeneral Virology等10多项杂志编委及特约撰稿人。 主要从事病毒与宿主之间相互作用的分子机制、基因调控的研究及基因治疗的研究。20 世纪90年代初研究腺病毒感染细胞后期选择性转送mRNA的机制，近期研究主要以腺病毒 或小环DNA为载体携带治疗性基因，进行抗肿瘤新血管生成，对载体的免疫原性