外排泵抑制剂抗菌增效作用的研究.pdfVIP

实验研究 ．35· 外排泵抑制剂抗菌增效作用研究 张许科1，刘兴金2，张晓会2 (1．洛阳惠中兽药有限公司，河南洛阳471003；2．河南省兽药工程技术研究中心) 摘 要： 为了研究外排泵抑制剂的抑茵增效作用效果，实验采用试管二倍稀释法对比观察了 三株临床致病性大肠杆菌和一株临床致病性金黄色葡萄球菌在使用外排泵抑制剂前后对乳酸环丙 沙星、硫酸黏菌素的最低抑菌浓度(M1C)。，结果显示，使用外排泵抑制剂后受试茵对相应药物的 MIC值均有不同程度的降低，说明外排泵抑制剂能够降低受试茵对受试药物的耐药性。 关键词： 耐药抑制剂；外排泵抑制剂；抗菌增效作用 外排泵(efflux pumps)是存在于细菌细胞膜上菌：金黄色葡萄球菌(Gx0006采自河南洛阳)。 的一类蛋白质…。研究发现，许多细菌可以通过外 2方法与结果 排泵系统将进入胞内的抗菌药物泵出胞外，从而使 2．1 实验分组 菌体内浓度降低而导致耐药。河南省兽药工程技 每种病菌对每种药物均设两组。平行对照 术中心以细菌细胞膜上的外排泵为靶点研制出的 组，不含外排泵抑制剂。实验组，外排泵抑制剂 实验浓度为10 细菌耐药性抑制剂(专利号：200610048418．5)。 txg／ml。质控组，检测质控菌(大 为了评价外排泵抑制剂INF一27l的抑菌增效作 用效果，实验以最低抑菌浓度(MIC)变化为观察另设两个对照组，空白对照组(只含培养基不含 指标，采用试管二倍稀释法旧1对比观察了三株临 菌液)，每组加MH培养基100tzl；菌液对照组 床致病性大肠杆菌和一株临床致病性金黄色葡萄 (培养基中含菌液，不含抗菌药物)，每孑L加菌液 100 球菌在使用外排泵抑制剂INF一271前后对受试 Ixl。 药物的耐药性变化情况p1。 2．2 药品配制 1实验材料 2．2．1抗菌药物储备液按照所需药物储备液 1．1 药品 浓度和药物纯度计算所需药物质量，配制抗菌 MH培养基(北京陆桥商检新技术公司 药物储备液。临床耐药菌用乳酸环丙沙星储备 070213)、营养肉汤(北京陆桥商检新技术公司液(5mg／m1)；硫酸黏菌素(125rrg／m1)；质控菌 用乳酸环丙沙星储备液(1 070117)、外排泵抑制剂(河南省兽药工程技术中心 Ixg／m1)。 2．2．2 提供070118)、乳酸环丙沙星(洛阳惠中兽药有限公 外排泵抑制剂储备液浓度为100“g／ml。 2．3 实验方法 司070125)、硫酸黏菌素(潜江生化有限公司 070106)。 2．3．1菌液培养实验前ld无菌挑取受试菌 1．2 实验器材 两环接种于营养肉汤培养基中，过夜培养。 2．3．2菌原液配制无菌条件下取营养肉汤中 96孔酶标板、200tzl移液枪、5—20斗l移液 枪(芬兰雷勃)、50ml容量瓶(以上器材需做无菌 的菌悬液，大肠杆菌比浊至8×108个／ml，稀释 至4×105个／ml，备用。金黄色葡萄球菌比浊至 处理)、培养箱(PYX一250S—A型广东韶关科力 实验仪器有限公司)。 5×108个／ml，稀释至5