发酵工业废菌体蛋白的分离提取工艺研究.pdfVIP

发酵工业废菌体蛋白的分离提取工艺的研究 雒伟锋 程宁宁 苏海佳 武 岳 北京化工大学生命科学与技术学院，北京100029 摘要：本研究以青霉素发酵工业的废菌丝体为原料，进行一系列的分离提取，从中获得的蛋白质，其可以作为 培养微生物的培养基成分。实验过程中通过单因素分析法确定分离提取过程中最佳的破壁时间，最适的反应温 度，并测定了破壁过程中反应体系的pH变化，最后还检测了所得产物中氨基酸的种类。在证明试验中，微生物 的生长状况显示以青霉素发酵废菌丝体中分离得到的蛋白质为主要成分的培养基培养微生物，与购买的商用培 养基成分按比例配制而成的培养基培养微生物的结果相比，两者微生物的菌落数相差很小，且菌落大小也无明 显差异。这说明以青霉素发酵工业的废菌丝体为原料提取的蛋白质可以作为微生物培养的营养物质。 关键词：废菌丝体;分离;蛋白质;微生物培养 第一届北京化工大学大学生创新创业论坛论文集 2012年11月 The1stBUCT Forum Nov．2012 Studcnts’CreativityProceeding 15，30，45，60min的pH。 2．3破壁反应时间的确定 (5)蛋白质中氨基酸种类检测及使用效果检 碱热法破壁是通过碱性物质与组成细胞 测 壁的糖类等物质发生反应，造成细胞壁结构的 最后检测所得到的蛋白质中氨基酸的种类，然 破坏，溶液进入细胞内，进行物质的交换，物 后配制成培养基。用自制的培养基培养酿酒酵 质溶解和交换的过程随着外界环境的变化而 母菌和市售的培养基培养的结果相比较，并得 变化，因此反应时间是十分重要的影响因素。 出结论。 如图3所示，碱热法破壁在较短的时间内 2结果与讨论 即可以完成。实际试验过程中，O．5h之后破 壁效果下降，这可能是随着反应时间的增加， 2．1细菌细胞壁的成分 破壁后释放的蛋白质可能因为时间过长而造 细菌细胞壁(如图1)厚约100’250nm，它 占细胞干物质的30％。细胞壁的主要成分为多 成的变质，进而导致吸光度的降低。随着反应 糖，其次为蛋白质、类脂。 时间的增加，破壁率不断提高，考虑蛋白质最 终提取率和成本，确定反应时间为0．5h O．的 0∞ 0∞ 2 墨 删n∞ 缸 皿 嘲075 070 图l：真菌细胞壁组成成分不意图 0．4 O．6 0．8 1．0 ．2 1．4 16 18 20 2．2 在不同类群的细菌中，细胞壁多糖的类型