Smad+4基因沉默PanIN细胞对裸鼠移植瘤增殖与微血管形成的作用的研究.pdfVIP

g--十一届全国中西医结合学会消化系统疾病学术会议 米非司酮为孕酮受体竞争性拮抗剂。在子宫肌瘤细胞中，雌孕激素受体含量较高，孕激素在肌 瘤的发生机制中起重要作用，细胞核分裂，促进肌瘤生长，雌激素可促进子宫肌瘤停止生长，甚至 萎缩。米非司酮是受体水平的抗孕激素药物．同时又有通过非竞争性抗雌激素作用，抑制下丘脑—· 垂体…性腺轴，使子宫肌瘤萎缩，诱发闭经【3)。 小剂量米非司酮12．5mg。每日一次，连用3个月。有效率77．5％。所有患者贫血纠正，肌瘤体积明 显缩小，血供减少，可作为术前用药。对围绝经期子宫肌瘤，伴有功能性出血尤为适用。结论：米 非司酮治疗子宫肌瘤有一定疗效，副作用小，是一种可行的保守治疗方法。 参考文献(略) Smad I 4基因沉默PanN细胞对裸鼠移植瘤增殖及 微血管形成的作用的研究 齐晓光1，慎睿哲1’，王立夫’，曹海霞2．朱黎明1， 董文杰1，章永平1，张本炎1，TvesonDA3 ORE； 海200092)；3国剑桥大学肿瘤科，剑桥CB2 4基因对PanlN细胞移植瘤增殖及血管形成的作用。方 【摘要】目的：探讨siRNA干扰Smad 各组肿瘤体积和质量，应用免疫组化方法检测并比较各组增殖细胞核抗原(PCNA)和CD31的表达 鼠肿瘤体积和质量显著增加(Po．05)；组织病理学检查，符合胰腺癌(腺癌)；免疫组化结果显示 增殖和肿瘤微血管形成可能是其致瘤恶性转化的重要作用机制。 【关键词】siRNA干扰：Smad4基因；PanIN细胞；细胞增殖：血管形成； 通常小于10％，表明DPC4基因在PanIN及胰腺癌发生中较特异的肿瘤抑制基因，深入研究其恶性转 intraepithelialncoplasia)细胞的致 化机制具有重要意义。本课题组研究前期表明，PanIN(pancreatic 瘤性，但并未见肺脏、肝脏、胰腺等器官转移，(数据未公布)，其病变类型类似于结肠腺瘤，再次 是否在Kras突变基础上小鼠PanIN细胞能否演变为进展期胰腺癌模型，及其体内促进肿瘤生长、血管 615 第二十一届全国中西医结合学会消化系统疾病学术会议 形成等的作用，从而探讨Smad4表达缺失后的恶性转化作用机制，为胰腺癌靶向治疗提供新的理论 依据。 l材料和方法 一、实验材料 l 细胞：PanlN细胞由美国宾夕法尼亚大学TuvesonD．A．教授惠赠，其为Kras突变小鼠基因打靶胰 动物中心提供。 3试剂：Smad4抗体(H-552，Santa Kit(Takara Signaling 发有限公司，Smad4等引物由上海英骏生物技术公司合成。 二、Smad4基因siI州A的合成及转染 1．sllI酬A静默PanlN细胞中Smad4表达 (1)构建和筛选能特异性静默PanlN细胞中Smad4表达的最佳siRNA稳定表达质粒： ① Airman和分子生物物理与分子生化系Alan 用小鼠U6启动子(由美国Yale大学生物系Sidney Garen教授共同所赠)构建含Zeocin药物抗性的siRNA表达母质粒。 ② 合成4对互补的靶向Smad4的寡核甘酸链。构成发夹式短小lⅢA(siRNA)，序列顺序为： 基因系列的互补寡核甘酸链作为对照(Mock)。 选取siRNA的4个靶向Smad4基因序列(19寡核甘酸)分别如下： 5’．GGA，r兀℃CTCATGTGJ气TC■3’ 5’．GGATGAGTACGTTCACGAC．3’