叶绿素测定分光光度法.docVIP

叶绿体色素含量的测定——分光光度法 叶绿体色素含量的测定——分光光度法 叶绿体色素溶液各组成成分在可见光谱中具有不同的特征吸收峰。因此，应用分光光度计在某一特定波长下所测定的吸光度，根据经验公式即可计算出色素溶液中各色素浓度，不同溶剂所提取的色素吸收光谱有差异，因此，应使用不同的计算公式。 叶绿体色素的提取常用丙酮和乙醇有机溶剂。叶绿体色素 80 ％丙酮提取液中叶绿素 a 和 b 及类胡萝卜素分别在 663nm 、 646nm 和 470nm 波长下有最大吸收峰，而 95 ％乙醇提取液中它们则在 665nm 石 49nm 和 470nm 波长下具有最大吸收峰，据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式（见结果计算），计算出叶绿体色素丙酮（或乙醇）提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度，并依据所使用的单位植物组织（鲜重、干重或面积），求算出色素的含量。 [ 实验目的 ] 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法，以及植物材料中各种色素含量的求算方法。 [ 器材和试剂 ] 1 ．植物材料 新鲜（或烘干）植物叶片，如菠菜叶片等。 2 ．实验器材 分光光度计、天平、研钵、剪刀、漏斗、滤纸、棕色容量瓶、吸水纸、擦镜纸和滴管。 3 ．实验试剂 80 ％丙酮（或 95 ％乙