刺五加中皂苷类化合物UPLC-ESI+MS研究.pdfVIP

第27卷增刊 分析测试学报 V01．27 FENXICESHI ofInstrumental NOV．2008 2008年11月 XUEBAO(JournalAnMysis) PLC—ESl 刺五加中皂苷类化合物的U MS研究 杜振霞，赵开径 (北京化工大学理学院，北京100029) senticosus Harms)为五加科植物，具有益气健脾、补肾安神之功效。刺五加中 刺五力I(Acanthopanax 含有与人参皂苷相似生理活性的刺五加苷A、B、C、D、E、F、G…。 mass 电喷雾质谱心1(electrosprayspectrometry，ESIMS)作为一种先进的软电离质谱技术，在天然产 物的分析中有着极为广泛的应用旧】。超高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术14’(UPLC—ESIMS)的迅 速发展，使植物粗提物中化学成分快速定性、定量成为可能”o。本文采用液液萃取分离，UPLC—ESI MS在线分析技术对刺五加粗提物中刺五加苷类成分进行分析鉴定研究。实验表明该方法无需标准品， 可以快速分析鉴定刺五加中的皂苷类化合物并提供结构信息。 1 实验部分 1．1仪器与材料 BEH UPLC(配有WatersAcquity 美国Waters公司超高效色相谱仪Aequity C18色谱柱、SampleManager Solvent 自动进样器、Binary Quattro 国Tedia公司)，水为超纯水(18．2 1．2样品溶液的制备 mL三口瓶中，用100 h。 称取干燥的刺五加叶粉末10g于250 mL乙醇(75％)，80℃下热回流4 回流液经旋蒸，得到浓缩浸膏，以20％乙醇的水溶液溶解。用石油醚、氯仿萃取，除去色素和脂溶性 杂质后，以正丁醇萃取3次，合并正丁醇层，旋蒸浓缩，以甲醇溶解，过0．22¨m滤膜，得样品溶液。 1．3 HPLC与ESIMS分析条件 超高效液相色谱条件：色谱柱柱温30℃；二元线性梯度洗脱：流动相(A)甲醇，(B)0．2％甲酸水溶 液；流速0．2mL／min；0—15min，流动相A：10％～100％，15～17min，流动相A：100％；样品室温度4 kV；萃取锥孔电压5V；RF透镜电压0．5 ℃；进样量5灿。质谱条件：电离模式ESI一；毛细管电压3．5 V；源温100℃；裂解温度400oC；锥孔气50L·h～；脱溶剂气流500L·h～；碰撞能量15eV。 2结果与讨论 采用“1．3”超高效液相色谱分离条件及质谱条件，进行选择离子模式检测。刺五加粗提物中的皂 苷类化合物得到较好的分离。在HPLC—ESIMS的一级谱中，皂苷化合物以[M—H]一准分子离子形 式存在，几乎没有碎片离子。得到相应化合物的相对分子质量信息分别为m／z574．9、370．8、383．1、 207、741．7。比较刺五加样品中5种成分色谱保留时间及质谱行为，初步确定刺五加粗提物正丁醇萃 取液中含有刺五加苷A、B、B1、C和刺五加苷D及其同分异构体E。为进一步确定上述5种化合物的 化学结构，均在负离子模式下，对其进行了多级串联质谱分析，见图l。 从图1A中可以看到，刺五加苷A的二级全扫描质谱产生一个主要的碎片离子，质荷比为m／z 179．2，是由一分子含氧葡萄糖基形成的碎片离子。图2(1)为刺五加苷A的断裂机理。从图1B可