枇杷果实发育中糖积累与其代谢相关酶的研究.pdfVIP

枇杷果实发育中糖积累及其代谢相关酶的研 究 吕秀兰’龚荣高张光伦李秀珍钟景勇 (四川农业大学林学园艺学院园艺系，雅安625014) 摘要本文研究了枇杷果实发育过程中糖积累及其代谢相关酶活性的变化动态，以及 它们与果实糖积累关系。结果表明：枇杷果实内转化酶活性降到最低时，果实开始糖分积累。 果实膨大期，糖迅速积累时，ss合成方向、SPS和ss分解方向活性均相应地快速上升，且 相关性达到显著水平。表明ss和SPS是影响枇杷果实糖积累的关键酶，它们的活性高，利 于果实糖的积累。可以认为枇杷果实糖分的积累是几种酶综合作用的结果。 关键词枇杷；糖积累；蔗糖合成酶(ss)；蔗糖磷酸合成酶(sPs)；转化酶(AI和NI) 枇杷果实众多品质指标中，甜味是最主要指标，果实品质在很大程度上取决 于糖的种类和数量。糖分的代谢积累就成为整个果实的发育及品质的形成。虽然 枇杷光合产物主要以山梨醇形式运输，但解放钟枇杷果实中可溶性糖却主要是蔗 糖，果糖和葡萄糖次之，山梨醇糖最少【l】。因而蔗糖代谢成为枇杷糖积累的关键 许多果实蔗糖代谢的关键酶‘撕l。目前，尚未见有关枇杷果实糖代谢相关酶变化 动态的研究报道。为此，本研究以解放钟枇杷为试材，报道了果实糖分和相关酶 活性变化，探讨出枇杷果实中糖分和相关酶的变化规律及相互关系。 1材料和方法 1．1试验材料 于2004—2006年，在成都市龙泉驿区选取10年生、树势健壮、常规栽培管 d(60afterfull 理并相对一致的解放钟枇杷代表性植株5株，从头花花后60 clays bloom，即60DAFB)开始，每15d取样果1次，每次按树冠外围中部的东、南、 西、北和顶部随机采取中等大小果实，每株5个，置于．20。C冷冻保存备用。 1．2糖分的提取与测定 果实糖分的提取方法参照文献【6】。糖分的测定用蒽酮硫酸法，其中每个反 应体系中包括取样液lmL和o．14％的蒽酮硫酸溶液3mL。分析数据为三年数据的 平均值。 1．3酶的提取与测定 酶的提取在0—4℃条件下进行。将每样果剖分为四份，取对称的两份，并在 这两份的可食部分取样，称取混合样1“29于研钵中，SPS和ss的提取和活性测 定参照龚荣高等【5】的方法：而Nl和AI的提取和活性测定参照参照Kubo等【7】的 宰通讯作者(Authorofcorrespondence)：xll吲@163．COrn。 基金项目：四川省农业厅重点资助项目(2004—2006)，四川农业大学科技创新基金(校005．21) 作者简介：吕秀兰女1964年7月生，[四JJI犍为人，副教授，研究方向：果树栽培理论与技术 116 方法，其中，酶液脱盐方法改为，用80％饱和度的(NH4)2S04沉淀酶蛋白，并用 10mmolt一1 t．1 mmolt-1 mmol EDTA， Hepes—NaOH脱盐缓冲液(含o．25MgCl2，1 lmmol·L-1 EGTA，0．01％p一毓基乙醇，o．05％BSA和0．2％甘油，pH7．5)将其溶解， 装入透析袋，在脱盐缓冲液中透析16h。酶蛋白的测定用考马斯亮蓝G．250法。 分析数据为三年数据的平均值。 2 结果与分析 2．1枇杷果实中糖含量的变化 由图1可见，在枇杷幼果期，果实中糖绝大部分为还原糖，蔗糖很少，总糖 含量很低；随着果实的发育蔗糖和还原糖含量不断上升，特别是从花后105天至 花后150天，即，果实膨大期，但蔗糖上升幅度更大，导致蔗糖含量高于还原糖。 之后总糖含量仍不断增加但较缓慢，还原糖含量继续增加，而蔗糖却变化不大。 这说明枇杷糖积累主要在果实膨大期和成熟期，膨大期主要积累蔗糖和还原糖， 而成熟期则主要积累还原糖。 sugar 80r—’!!堡息塘Total ∞ 誉甚