培养大肠癌干细胞球与筛选大肠癌干细胞标志的的研究.pdfVIP

第二届“CSCO一南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛 向周围组织侵犯，发生局部或淋巴结转移；侵及血管，并通过血管壁进入血液而发生血行转移。HPSE是肿瘤细胞扩散与转 移过程中的一个关键酶。 白阳性表达率显著高于临床分期I期和Ⅱ期胃癌(PO．05)，证明随着肿瘤的浸润、转移能力的增强，HPSE表达也增强，换 言之，HPSE阳性表达的胃癌患者淋巴结转移及远处转移的机率高于阴性表达者，提示I-IPSE可能存在促进或协同促进肿瘤 细胞扩散和或转移的作用：本研究中还发现，I-IPSE蛋白表达阳性的胃癌患者中位生存时间明显短于阴性表达者，提示HPSE 蛋白表达阳性的胃癌患者生存期短，预后差。 Tang等研究了116例原发性胃癌，利用肝素酶cDNA探针调查了人胃癌不同阶段的肝素酶表达情况，结果显示肝素酶 的表达主要出现在晚期胃癌中，同时还发现肝素酶的过量表达与肿瘤的浸润性生长及肿瘤新生血管的形成有关，不过并没有 的表达，胃癌组织中HPSE的表达与肿瘤体积和局部淋巴结转移有明显正相关性。高表达HPSE的患者预后差。我们的研究 也刚好证实了这两个过程。 酯)是较早发现的I-IPSE底物竞争性抑制剂，持续给予可以抑制大鼠腺癌的生长、血管形成和淋巴结转移。该药目前已完成 针对肝癌的多中心Ⅱ期临床实验。并已证实取得突破性成果，该试验证实对于治疗手术切除后的肝癌PI-88能够有效延续其 研究表明它能选择性抑制HPSE活性，其抗转移效应现正在进行动物实验。最近还发现了一种天然的I-IPSE抑制剂，即嗜酸 性粒细胞MBP(majorbasic 赖的方式抑制重组的I-IPSE活性，它在嗜酸性粒细胞颗粒中的存在显示其在炎症相关疾病和癌症进展中的保护作用。 本研究测定胃癌组织中I-IPSE蛋白的表达，有助于临床判断胃癌病人预后，并分子靶向治疗药物在胃癌的应用提供了理 论依据。 培养大肠癌干细胞球及筛选大肠癌干细胞标志的的研究 肖冰，李鹰飞(南方医科大学南方医院消化科，广东广州510515) 和RT-PCR半定量分析分别检测两组细胞。免疫缺陷鼠移植瘤实验比较两组细胞成瘤能力。结果：大肠癌干细胞球表达肠道千细胞标志Musashi．I． 显差别。RT-PCR半定量分析表明大肠癌千细胞球具有很强的自我更新的能力。大肠癌干细胞球具有高成瘤能力。 千细胞标志。 关奠调：大肠癌。千细胞球 最近的研究表明，肿瘤组织中存在着-d,部分表达特异表面标志的肿瘤细胞，它具有不断的自我更新能力和一定的分化 潜能，在动物移植瘤实验中它具有极强的致瘤性，因此被称为肿瘤干细胞。研究发现它所具有的自我更新和未分化的特性是 受肿瘤间质细胞、血管内皮细胞等微环境调控的，同时它高表达耐药蛋白，具有极强的DNA损伤后修复功能，因而具备耐 药和放射抵抗性。因此，肿瘤干细胞是肿瘤始动的根基，是肿瘤转移、复发和耐药的根源。目前已在白血病和乳腺癌、脑肿 瘤、胰腺癌、大肠癌等多种实体肿瘤中发现肿瘤干细胞的存在。 而肿瘤细胞系作为研究肿瘤的经典模型，自TomKondo等发现多种已建系的肿瘤细胞系中存在少量的肿瘤干细胞后。 细胞系中肿瘤干细胞的研究有一定进展，但大多局限在胶质瘤、乳腺癌等细胞系。国内朱玉德等发现，人脑胶质瘤细胞能在 o ·173 第二届“CSC0一南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛 含生长因子的无血清培养基中形成细胞球，这种细胞球富集了肿瘤干细胞，因而称之为脑肿瘤干细胞球。目前为止，研究大 肠癌细胞系中肿瘤干细胞的报道不多。因此，本实验选取一株人大肠癌Col0205细胞系，试图研究特殊培养条件下大肠癌 Col0205细胞如何生成大肠癌干细胞球，并对大肠癌于细胞球进行鉴定和生物学研究，以期为进一步研究大肠癌干细胞球的 特性莫定基础。大肠癌Col0205细胞是Toni 胞，在常规培养基中具有悬浮和贴壁生长的混合型生长特性． 一．研究方法 I．大肠癌干细胞球的培养无血清DMEM／F12培养基(serum-free medium,SSM)培养的普通 谷氨酰胺等，培养大肠癌Col0205细胞，以含10％胎牛血清的1640培养基(serum-