羧甲基化改性茯苓粉体外抗氧化活性研究.pdfVIP

中国菌物学会第四届会员代表大会暨全国第七届菌物学学术讨论会 羧甲基化改性茯苓粉体外抗氧化活-I生的研究 梅光明李成华刘莹 黄文+ (华中农业大学食品科技学院 武汉430070) 摘要：为了较全面评价羧甲基化改性茯苓全粉体外抗氧化活性，分别测定了其在化学体系和生物体系的抗氧 化能力。化学模拟体系实验表明，羧甲基化改性粉具有还原能力，表现抗氧化活性的可能：化学发光法评价羧甲 基化改性粉的抗氧化活性。发现其具有清除超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢的作用：体外抗氧化试验表明。 改性粉具有抑制小鼠红细胞溶血，抑制小鼠肝组织匀浆MDA的生成和肝线粒体肿胀度的作用。 关键词：茯苓，羧甲基化改性，抗氧化活性 茯苓(PoriaCOCOS)是一种属于担子菌纲(Basidi (Polyporaceae)的真菌，寄生于红松、马尾松根部。自古以来茯苓是中国和一些亚洲国家的传统 中药材，其应用至今已有2000多年历史。历代医学家称其“通神而至灵，和魄而炼魂，利窍而益 肌，厚肠而开心，调心而理胃，上品仙药也”。中国茯苓资源丰富，主要产地有湖北、云南、安 徽、四川、广西、福建、湖南、浙江等省(王玉欣等， 2001)，湖北罗田九资河的茯苓，在国际 市场上享有很高的声誉。茯苓作为一种药食兼用资源之一，其主要成分茯苓多糖水溶性差，生物 活性较低，影响了茯苓在医药，特别在食品方面的应用。将茯苓全粉进行羧甲基化化学改性粉体， 可以极大地提高其溶解等食品加工特性。本文从化学体系和生物体系两个方面对羧甲基化改性茯 苓粉体的抗氧化作用进行了研究，运用化学发光法测定了清除超氧阴离子、羟基自由基和过氧化 氢的能力，研究了改性粉对昆明小鼠红细胞、肝匀浆和肝线粒体脂质过氧化的影响，为改性粉体 应用于高附加值保健食品加工中奠定理论基础。 1材料与方法 1．1试验材料 ¨．1茯苓粉：购于湖北九资河 1．1．2实验动物 SPF级昆明种小白鼠，雌雄性各半，体重20．0 4-2．09，由湖北省实验动物研究中心提供。生 产许可证号SCXK(鄂)2003．0005。使用许可证号SYXK(鄂)2003．0014。 1，1．3主要试剂 Vc购自上海试剂二厂；鲁米诺购白SigmaCo．，USA公司；过氧化氢购自北京化工厂；邻 苯三酚、邻菲哕啉、乙二胺四乙酸二钠和抗坏血酸均购自国药集团上海化学试剂公司；MDA试 剂盒和SOD试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 1．1．4主要仪器 $22分光光度计购自上海棱光技术有限公司；BPCL型超微弱化学发光测量仪购自中国科学 院生物物理所。 1．2试验方法 1．2．1羧甲基化改性茯苓粉制备 采用二次加碱法。取59干燥过100目茯苓粉(茯苓多糖以84％计)，在60℃温度下，25mL 乙醇水溶液中搅拌溶胀O．5h，加入一定量的固体NaOH搅拌，碱化反应2h后，再加入相同量的 乙醇水溶液洗涤4次、干燥，得到外观为白色的羧甲基化茯苓多糖。 1．2．2羧甲基化改性粉钵还原力的测定 。通讯作者： 中闷菌物学会第妇届会员代表大会暨全闱第七届茼物学学术讨论会 0．2mol／L的PBS(pH6．6)+1．5mL 0．3％ FeCl3混匀，再加3mL蒸馏水摇匀，以蒸馏水凋零，测定A700。A7∞越大，表示还原能力越强。 用蒸馏水作为无还原能力对照，Vc作为有还原能力对照。 1．2．3羧甲基化改性粉体清除超氧阴离子能力的测定 采用邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系(Guo,1989)测定清除超氧阴离子能力。向发光池中注入 入鲁米诺．碳酸盐缓冲液0．94mL启动反应(30℃)，间隔2s记数发光强度，测定300s内化学发光动力学 曲线，至出现峰值，用蒸馏水做空白对照组，本底发光强度为未加邻苯三酚时的发光值，计算抑制率。 100％ 抑制率=【(Cll-CIoF(C12一Clo)】／(CIvCIo)x 式中Cll为空白对照组的相对发光强度，Clo为木底组相对光强度，C12为样品组相对发光强度。 1．2．4羧甲基化改性粉体清除羟基自ffl基能力的测定 用(袁慧慧等，2005；龙盛京等，2006)。加不同浓度的样晶液50儿在样品池中，分别依次加 lmmol／L CuS04溶液50此，lmmol／L邻菲哕啉溶液50此及O．05