中外10个猪种IGFBP3基因PCR-RFLP多态性研究的论文.pdfVIP

第十次全国畜禽遗传标记研讨会论文集 赵云翔，陈永晴，任广彩，刘德武+ (华南农业大学动物科学学院，广州510642) 摘要；研究使用PCR-RFLP技术，分析了中外10个猪种(长白猪、皮特兰猪、玉山黑猪、 五指山猪、-：-删t、蓝塘猪、莆田猪、陆川猪、隆林猪和槐猪)计315个样本的IGFBP3基 因内含子4Ec072I限制性内切酶多态性情况。结果表明：皮特兰猪，蓝塘猪和莆田猪无AA型， 二花脸猪、槐猪、玉山黑猪、莆田猪和陆川猪无GG型，中国猪种除二花脸猪和五指山猪有较 高的AA基因型频率外，其它猪种均以杂合子AG型占优势；国外猪种AA型频率较低，而GG 和AG相对较高。X2检验结果表明除长白猪，二花脸猪和蓝塘猪外，其它猪种在该基因位点分 布频率均偏离Hardy．Weinberg定律。 关键词：猪；IGFBP3基因；PCR．RFLP 生＆性状是畜禽生产中最受关注的性状之一，动物的生长发育主要受内分泌生长轴的调控。其中， GrowthFactor)介导的。 生长激素(GH)是生长轴的核心，其促生长作用主要是通i血GFs(Insulin-like IGFs是一类与胰岛素高度同源的单链多肽物质，对神经、肌肉、骨骼的发育，以及细胞的增殖和转化等 GrowthFactor 有着重要影响…。IGFs家族包括IGFs、IGF受体(Insulin-like 动物生长发育中发挥重要的功能”J。 过变性高效液相色谱技术(DHPLC)筛查得到了大量的单核苷酸多态性位点，并通过标记与性状的关联 分析，认为其对猪的部分生长性状有重要影响…。本研究将采用PCR-RFLP方法对中外10个猪种随机群体 的IGFBP3基因内含子4的Ec072I位点进行多态性分析，旨在了解该位点在不同品种中的基因分布情况， 为进一步从事该基因结构和功能的研究提供依据。 1材料与方法 1．1实验辛措 试验选取中外lO个猪种计315个样本为研究对象，分别为长白猪(L)33头、皮特兰猪@43头、二花 (N)20头、莆田猪(PT)33头和陆川猪(Lc)27头。 猪基因组DNA采用常规的酚，氯仿法提取“。 1_2引物设计和PCR扩增 根据已知序列(GenbankNo：AY422045)设计引物。 —上游弓【物： 5’．CGC把CClAAAAAGAOCAAAAC．3， 下游引物： 5’啊GccAcAAGGAGACAllAGAAAl二3’。由上海生物工程公司合成。 基金项目：国家自然科学摹金项目资助 dwliu@s,cau．edu．en ★通讯作者l刘德武(1966-)，男，博士．副教授，主要从事分子遗传与动物育种方向研究。E-maih No1 Animal Bulletin (October2006)V01．10 Biolechnology PcR产物检测和酶切：取4止PCR产物，经1％琼脂糖凝胶电泳检测，选择特异性强的产物用于酶切反应。 胶电泳检测，以5～10V／cm电压电泳约25分钟，用凝胶成像系统进行拍照并记录结果。 1．3统计方法 基因型频率(FAiAj)=(AiAj个体糊群体总样本数)×100％ 基因频率(FAi)=FAiAi+I／2 EFAiAj 2结果与分析 2．1PCR酶切结果 ． GG基因型(376bp)，如图1所示。 图1 PCR产物经Ec072I酶切产物电泳图谱 2．2不同品种的基因型和基因频率 本研究对中外10头品种共315头样本进行PCR-RFLP分析，各品种基因型频率和基因频率如表1 所示。从表中可以看出，皮特兰猪、蓝塘猪和莆田猪无AA型，隆林猪、玉山黑猪和陆川猪从型频率 也较低。另外，二花脸猪、槐猪、玉山黑猪、莆田猪和陆川猪无GG型，五指山猪GO基因型频率也较 低。中国猪种除