基于树枝状高分子探针电化学发光法检测甘露聚糖.pdfVIP

基于树枝状高分子探针电化学发光法检测甘露聚糖 杨娜，马芬，漆红兰，高强，张成孝* (陕西省生命分析化学重点实验室，陕西师范大学化学与材料科学学院 陕西 西安 710062) *联系人：029 E-mail: cxzhang@snnu.edu.cn 电化学发光分析法由于其灵敏度高、选择性好、可控性好、仪器简单等优点 已成功应用于环境科学、生命科学和材料科学等领域。树枝状聚合物聚酰胺-胺 ( PAMAM)[1]是一种三维的、高度枝化的树枝状高分子，具有单一分散性、无免 疫原性、细胞毒性较低、生物可降解等特性，因而它可作为信号放大的负载物质 应用于生物传感器中，而钌化合物具有高发光效率、可再生等优点，故以PAMAM 负载钌联吡啶配合物作为信号物质，可极大的提高生物传感器的灵敏度。本文旨 在建立一种高灵敏的电化学发光传感器检测甘露聚糖的方法。 本文以单壁碳纳米管（SWCNTs）修饰石墨电极(GE)，以伴刀豆球蛋白（Con A ）为分子识别物质，甘露聚糖（Mannan ）为分析对象，以负载有Ru 的聚酰胺- 胺(PAMAM，G4)树枝状分子(PAMAM-Ru) [2] 为电化学发光信号物质，研制一种 新型高灵敏检测甘露聚糖的方法，检测原理见图1。当没有目标物甘露聚糖存在 时，有很强的电化学发光信号；当目标物甘露聚糖存在时，Mannan与Con A结合， 电化学发光信号降低。根据电化学发光强度的变化，可以检测甘露聚糖。本工作 首先合成PAMAM-Ru, 其次，PAMAM-Ru 的氨基共价结合到通过EDC/NHS活化 羧基化碳纳米管修饰石墨电极（GE/SWCNTs ）表面的羧基上，最后通过戊二醛 交联法将识别分子Con A共价连接到已修饰石墨电极表面上,0.1%的牛血清白蛋 白封闭电极。 本文优化了Con A与Mannan 的结合的时间、工作电位等，在优化的实验条件 下，考察了构建的的高灵敏检测甘露聚糖的电化学发光生物传感器的分析特性。 -11 -9 实验结果表明1.0×10 ~5.0×10 mol/L之间信号随Mannan浓度的增加而降低，并 逐渐趋于饱和状态。电化学发光强度的变化值(△IECL)与Mannan浓度的对数值 -11~1.0×10-9 mol/L范围内呈良好的线性关系，线性方程为 (lgC)在1.0×10 △I 2 -12 ECL=12898+1150.9 lgC(R = 0.9926) ，检出限为4×10 mol/L(S/N=3) 。试验结果 表明该传感器具有灵敏度高、重现性好等优点。 3000 2400 2500 L 1600 C E