高效液相色谱-串联质谱法检测.pdfVIP

Application Note: CM0003 高效液相色谱-串联质谱法检测 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留 1 2 陈冬梅 ，刘飞 1．华中农业大学国家兽药残留基准实验室；2. 赛默飞世尔科技（上海）公司色谱质谱部 关键词：TSQ Quantum, 糖皮质激素类药物, LC/MS/MS 糖皮质激素是由肾上腺皮质分泌的一类甾体激素，具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成 和代谢的作用，还具有抗炎作用，称其为“糖皮质激素”是因为其调节糖类代谢的活性最 早为人们所认识。糖皮质激素的基本结构特征包括肾上腺皮质激素所具有的C3的羰基、Δ4 Key Words 和17β酮醇侧链以及糖皮质激素独有的17α-OH和11β-OH（见图1）。 • TSQ Quantum • LC/MS/MS • 糖皮质激素类药物 图1 几种糖皮质激素药物结构 糖皮质激素类包括可的松（皮质素）和氢化可的松（皮质醇）等。这类激素对糖、蛋白质 和脂肪代谢都有影响，主要作用是促进蛋白质分解和肝糖原异生。当食物中糖类供应不足 （如饥饿）时，糖皮质激素分泌增加，将促进肌肉和结缔组织等组织蛋白质的分解，并抑 制肌肉等对氨基酸的摄取和加强肝糖异生，还促进肝糖元分解为葡萄糖释放入血以增加 血糖的来源，血糖水平得以保持，使脑和心脏组织活动所需的能源不致缺乏。作为药物 使用，大剂量的糖皮质激素有抗炎、抗过敏、抗毒素作用，有抗休克和抑制免疫反应等作 用，故医学上应用广泛，但也有不可忽视的对中枢神经系统、内分泌及代谢系统、消化系 统、心血管系统、运动系统、下丘脑－垂体－肾上腺皮质系统等的多种副作用。动物生长 过程中过量使用这些激素会导致其在动物源性食品中的残留，影响人类健康。因此，不同 国家对动物源性食品中糖皮质激素的最大残留量都做了规定。我国农业部文件《动物性食 品中兽药最高残留限量》规定牛、猪、马的肌肉、肝脏和肾脏中的地塞米松最大残留量为 0.75 μg/kg，牛奶中氢化可的松的最大残留量为10 μg/kg。欧盟规定地塞米松在牛、 猪、马的肌肉和肾脏中的最大残留量为0.75 μg/kg，在肝脏中的最大残留量为2 μg/kg， 在牛奶中的最大残留量为0.3 μg/kg；甲基强的松龙在牛的肌肉、肝脏和肾脏中的最大 残留量均为10 μg/kg；泼尼松龙在牛的肌肉、肝脏、肾脏和牛奶中的最大残留量分别为4 μg/kg，10 μg/kg，10 μg/kg，6 μg/kg。为保证人类的食用安全，建立准确可靠的定 量定性方法是十分必要的。 目前，对于动物源性食品等不同基质中糖皮质激素类药物的检测方法主要采用液相色谱法 （HPLC）、液质联用法（LC-MS 或LC-MS/MS）和气质联用法（GC-MS）。本文采用LC- MS/MS法建立了猪、牛、羊的肝脏和肌肉，鸡肉，鸡蛋，牛奶的中泼尼松（prednisone)、 泼尼松龙（prednisolone)、地塞米松（dexamethasone、倍他米松（betamethasone）、氟 氢可的松（fludrocortisone acetate,）、甲基泼尼松（methylprednisolone）、倍氯米松 （beclomethasone）、氢化可的松（hydrocortisone）的检测方法。 1. 实验部分 1.1 仪器与试剂 TSQ Quantum三重四极杆串联质谱仪（赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific公司），配置 有电喷雾电离源（ESI）；Surveyor LC液相色谱系统，包括Surveyor AS自动进样器。 标准品泼尼松（prednisone，≥98 %)、泼尼松龙（prednisolone, ≥99.5 %)、地塞米松 （