里氏木霉R3液体深层发酵产纤维素酶工艺优化研究.pdfVIP

维普资讯 第27卷第5期 河南工业大学学报 (自然科学版) Vo1．27，No．5 2006年 10月 JournalofHenanUniversityofTechnology(NaturalScienceEdition) 0ct．20o6 文章编号 ：1673—2383(2006}05-0047-04 里氏木霉 R3液体深层发酵产纤维 素酶工艺优化研究 康东亮 ，吕世峰 ，阎振丽 ，鲁丰雨 ，王 芬 (1．河南天冠企业集团，河南 南阳473000；2．南阳普康集团，河南 南阳473003) 摘要：研究了温度、pH值、溶氧对里氏木霉 R3液体深层发酵产纤维素酶的影响，并进行 了工艺 优化 ．用50L全 自动通气机械搅拌发酵罐 ，接种量 10％，发酵过程采取分段控制pH值、温度和 溶氧的工艺，发酵 120h酶活力 最高，FPA和 CMC酶 活力分别达到 48．9FPIU／mL和 321．68 IU／mL，FPA酶活比工艺优化前提 高了221％． 关键词 ：里氏木霉；纤维素酶 ；液体深层发酵 中图分类号 ：TS201．3 文献标识码：B 80目筛 ． 0 前言 1．2 培养基 斜面培养基 ：PDA琼脂培养基 ． 长期以来国内乙醇生产企业耗用大量的粮食 摇瓶液体种子培养基 ：3％葡萄糖 +1％玉米 发酵生产乙醇 ，随着燃料乙醇的逐步推广使用 ，巨 浆 +0．2％无机营养盐，pH5．2，分装于2L三角瓶 大的乙醇需求量对我 国的粮食安全形成的威胁 日 后 ，0．1MPa压力 ，121℃下灭菌30min，冷却后备 益显著 ，因此选择发酵乙醇 的粮食替代成为十分 用 ． 重要的课题 ．近年来利用农作物秸秆发酵生产燃 发酵培养基：2．5％玉米皮 +2％微 晶纤维素 料乙醇 已成为人们研究的热点，然而以秸秆纤维 +2％玉米浆 +0．2％无机营养盐，pH5．2，0．1 制乙醇时纤维素酶制剂成本 占纤维素生物转化总 MPa压力 ，121℃下灭菌30min，冷却后接种 ． 成本 的50％～60％，是秸秆原料 的50倍左右 ，造成 1．3 主要仪器与设备 纤维乙醇成本居高不下_l。J．目前普遍采用的液体 YxQwY一22型灭菌器 ：上海医用核子仪器 深层发酵工艺生产的纤维素酶 ，其生产成本距实 厂；SHJ—sA一1480—2型超净工作台：上海上净净 际应用纤维素酶解糖化尚有一定的距离_4J．作者 化设备有限公司；sHP一250型生化培养箱 ：上海 对液体发酵生产纤维素酶 的工艺进行 了研究，应 精宏实验设备有限公司；TG16一ws型台式高速 用液体发酵生产 的纤维素酶于纤维素酶解糖化 ， 离心机 ：长沙湘仪离心机仪器有限公司；2100型 进而使发酵生产低成本纤维乙醇成为可能 ． 722分光光度计 ：UNIC；Fus一50L(A)全 自动通气 机械搅拌发酵罐 ：上海国强生化工程装备有限公 1 材料与方法 司；sHA—c型精密恒温水浴振荡器 ：江苏金坛中 大仪器厂 ． 1．1 菌种与材料 1．4 实验方法 菌种 ：里 氏木霉 (TrichodermareeseiR3)，购于 1．4．1 斜面培养 浙江大学；微晶纤维素 (Avice1)；玉米皮 ：粉碎后过 30℃培养5～7d．