酶底物法在食品中大肠埃希氏菌MPN计数的应用研究.pdfVIP

54 应用预防医学 2015年2月第21卷第1期 JApplied Prev Med, February 2015, Vol 21 No.1 ·实验研究 · + 文章编号：1673-758X(2015)01-0054-03 中图分类号：R378.2 1 文献标识码：A 酶底物法在食品中大肠埃希氏菌MPN计数的应用研究 李涛，黎明，苗艳芳，杨洋 四川省成都市疾病预防控制中心（四川成都610041） [摘要] 目的 探讨酶底物法在食品中大肠埃希氏菌MPN计数的应用，并对市售的2种酶底物试剂EC-MUG和 科立得（Colilert）MMO-MUG进行比较。方法 分别用两种酶底物试剂检测菌悬液和对6类食品大肠埃希氏菌MPN计数， ’ 同时用参考方法GB4789.38—2012大肠埃希氏菌MPN计数检测，用McNemar s检验对结果进行分析。结果 EC-MUG和 科立得MMO-MUG酶底物检测菌悬液和6类食品的大肠埃希氏菌MPN计数，与参考方法比较，无统计学差异（χ =2 0.01，P﹥0.05）。EC-MUG和科立得MMO-MUG酶底物检测无统计学差异（χ =0.01，P﹥0.05）；科立得MMO-MUG2 酶底物检测结果易判断。结论 酶底物法检测食品中大肠埃希氏菌MPN计数方便、快捷，有良好的应用前景。 [关键词] MUG酶底物；食品；大肠埃希氏菌MPN计数 大肠埃希氏菌（E.coli），俗称大肠杆菌，曾被 （ATCC25922）和产气肠杆菌（ATCC13048）购自 认为是人类和动物肠道中正常菌群的一部分。多数 广东环凯微生物科技有限公司。将上述各实验菌 大肠埃希氏菌在肠道内不致病，在一定条件下可引 株接种于营养琼脂斜面,37℃培养18～24h后，用 [1] 起肠道外感染 。作为人和温血动物粪便污染的最 生理盐水制成0.5个麦氏浓度的菌悬液，将 [2] -9 佳指示菌，大肠埃希氏菌检出的意义最大 。在卫 ATCC25922菌悬液进行10倍梯度稀释至10 级， -4 -9 生学上，大肠埃希氏菌是国际上公认的检测各种食 以10 ～10 级稀释度进行试验，以ATCC13048菌 品、医药、环境水质在流行病学上安全性的指示菌 悬液作阴性对照。 [3,4]，也是作为检测环境及食品是否被肠道病原菌污 1.2 实验样品 2013年3月—2014年5月成都市 [3] 染的可靠指标 。目前，我国用于食品中大肠埃希 市售6类食品8批次共191件样品，其中畜肉制品 氏菌MPN计数的GB4789.38—2012 《食品安全国家 45件、禽肉制品25件、水产品28件、生食蔬果41 标准食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》方 件、乳及乳制品20件、米面制品32件。 法，是先进行初发酵试验，然后复发酵，再分离菌 1.3 培养基及试剂 LST肉汤、EC肉汤、磷酸盐缓 株，再用传统的生化鉴定方法检测大肠埃希氏菌。 冲液、EMB琼脂、靛基质、MR-VP、柠檬酸盐试剂 [5] 此法耗时长、操作繁琐。1981年，James等 提出 均购自北京陆桥技术有限公司，EC-MUG购自青岛海 4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷可作为检测大 博生物技术有限公司、科立得（Colilert）MMO-MUG 肠埃希氏菌的底物。随后,又发现了微生物体内特有 购自爱得士（IDEXX）公