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新技术、新方法在药代动力学与生物等效性研究中的应用 钟大放(沈阳药科大学药物代谢与药物动力学实验室) 药代动力学和制剂生物等效性研究的技术难点是血浆中微量药物或活性代谢产物的测试。随着现代药 物作用选择性的提高，剂量越来越低，有时需要测试的血药浓度在p异／ml水平，并且血浆样品基质复杂，所以 分析方法的灵敏度、选择性、精密度、准确度、测试速度是衡量一项新技术的基本指标。 一、通常采用的分析方法及其局限性 血浆样品分析采用的经典方法是HPLC方法，其检测器包括紫外、荧光、电化学等，其定量限一般在10 rain，方法的选择性不强，建立新方法需要2—4星期时问。GC 一100．g／ml，每个样品测试一般需要15～30 或GC／MS方法仅适用于部分可挥发性药物的分析。此外，微生物学方法和免疫学方法也仅用于特殊类别 的药物分析，且重现性和选择性不佳。液相色谱一质谱联用法近年来迅速普及。 二、液相色谱一质谱联用法的发展 取得成功；1991年，API 应用最广的分析仪器。 据美国质谱协会的统计，药物色谱分析中不同方法所占比例近年来发生了巨变： 1990年：HPLC约占85％，GC／MS占12％，LC／MS占3％； 2000年：HPLC约占15％，GC／MS占5％，LC／MS占80％。 对生物样品中药物浓度的液相色谱一质谱联用法分析，通常采用三重四极杆串联质谱(LC／MS／MS)的 选择反应监测方式，即在第一级质谱选定准分子离子，第二级质谱选定某一碎片离子。两级质谱分析排除了 几乎所有共存化合物的干扰，使最终结果的化学噪音降低，得到非常高的分析选择性。 色谱分离，并且一次分析可以对多种化合物进行定量。主要由于这一原因，大大缩短了建立一种新分析方法 所需的时间。LC／MS／MS分析每个样品的时间仅为3—5min，每个工作日测试样品超过100个。但是，为 了克服离子抑制现象，对主要的内源性强极性组分进行色谱分离是LC／MS／MS必要的步骤。 三、液相色谱一质谱联用法应用实例 以下列举本实验室近年来采用液相色谱一质谱联用法开展药代动力学和制剂生物等效性研究的实例， 说明该项技术的适用范围。 (续表) 11 坎地抄坦 O．05．100n∥ml 12 吡拉西坦 50．4000n∥ml 13 倍他司汀代谢物 1—8∞n晷／ml [11] 14 二氢麦角胺及代谢物 O．01—1．o|l∥Ⅲl，0．Ol—I．on∥Ⅱll [12] 15 佐米曲普坦 0．05删30 0∥1日l 16 普罗帕酮及代谢物 5一1000n洲，5一10∞ng／Ⅲl [13] 呼吸系统药 17 班布特罗 0．05—8．0n∥lnl [14] 18 克仑特罗 0Ol一2．On∥ml [15] 19 特布他林 O05—8．0n∥ral [16] 20 伪麻黄碱 2—40011∥ml [17] 21 氧去甲右羹沙芬 O．2—80．0ng／ml [18] 22 羧甲司坦 20—8∞on