生物化学基础 教学课件 作者 靳利娥刘玉香秦海峰谢鲜梅 等编 第9章2 核酸代谢.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 RNA聚合酶DNA聚合酶的比较 尚辅网 尚辅网 三、转录过程 1、过程分为起始、延伸和终止三个 2、操纵子（转录单位）：从起始位点（启动子）至终止位点（终止子）的整个转录区段 3、启动子（promoters）：可被RNA聚合酶识别、结合并启动RNA转录的特定DNA序列。 原核生物启动子约由40个核苷酸序列组成。分三个区：起始识别区（-35 个核苷酸 识别RNA聚合酶）、牢固结合区（-10 个核苷酸 DNA双链局部解旋） 、转录起始区 尚辅网 原核生物启动子 上游 下游 尚辅网 存在两个共同顺序： -25 区 TATA 盒，又称为 Hogness盒，由A、T 碱基所组成，其功能与聚合酶的定位有关，DNA 双链在此解开，并决定转录的起始位点。 -75区 CAAT盒，一致序列为GGTCAATCT，CAAT 盒与转录的起始频率有关。 真核生物基因组中还有一个增强子（enhancer）序列，它能极大地促进启动子的转录活性。 真核生物的启动子 尚辅网 真核生物启动子 尚辅网 转录过程（原核生物） 过程一：识别 σ因子识别转录起始点，酶与该区结合后，即滑动至-10区，DNA双链解开，启动转录。 过程二：起始（启动物、全酶和核苷三磷酸三元复合物的形成） 起始位点，全酶结合第一个核苷三磷酸GTP或ATP，并催化其与另外一个三磷酸核苷聚合，形成第一个3,5-磷酸二酯键。 尚辅网 尚辅网 过程三：延伸（ RNA-DNA杂交） RNA聚合酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。合成约10个碱基， σ解离，陆续形成RNA-DNA杂交区 过程四：终止 由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号，并促使RNA的释放；或者不依赖 ρ因子，转录终止点处存在相连的富含GC和AT的寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 尚辅网 终止因子及ρ因子 协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子（蛋白质）称为终止因子 (termination factor)。 存在两种终止机制：依赖ρ因子与不依赖ρ因子 ρ因子是RNA聚合酶的一种 重要的蛋白质辅助因子。催化 解开DNA-DNA和RNA-DNA 双螺旋结构。 尚辅网 大肠杆菌两类终止子结构 不依赖 ρ因子 依赖 ρ因子 G-C区 U区 尚辅网 真核生物和原核生物转录的区别 真核生物中转录与复制在不同的区域 RNA聚合酶不相同 启动子不同 转录后RNA加工修饰不同 尚辅网 四、RNA转录后的加工 剪切：去除不需要的部位。如：除去内含子转录来的序列； 剪接：将成簇排列的基因转录产物切开。如：核内不均一RNA的降解与修饰； 修饰：核糖或碱在的修饰。如甲基化、羟基化等。 尚辅网 真核细胞mRNA的加工 5′ 帽子 PolyA 3′ AAAAAAA-OH 剪接：剪去内含子(intron)，拼接外显子(extron) 5′端接上 帽子结构 3′端添加PolyA尾巴结构,由RNA末端核苷酸转移酶催化 尚辅网 RNA的拼接 尚辅网 RNA转录的抑制作用 RNA的转录抑制剂之一嘌呤和嘧啶类似物: 尚辅网 RNA的转录抑制剂之二模板功能抑制物 1）烷化剂：氮芥、磺酸酯、氮丙啶、乙撑亚胺等 2 ）放线菌素 3）嵌入染料：溴化乙锭等 RNA的转录抑制剂之三RNA聚合酶的抑制物 1）利福平霉素：利福平 2）链霉素 3）α-鹅膏蕈碱 4）放线菌素 尚辅网 复习及作业 名词解释 基因，中心法则，半保留复制，半不连续复制复制子，双向复制，冈崎片段，端粒酶，逆转录 DNA复制有哪些特点？ DNA的复制过程 参与复制起始的各种酶及其功能 简述DNA损伤的修复机制 尚辅网 DNA和RNA合成的比较 尚辅网 名词解释 转录、不对称转录、 RNA聚合酶核心酶、转录启动子、外显子、. 内含于、核酶 复制与转录过程的异同点。 原核生物RNA聚合酶各亚基在转录中的作用。 为何说RNA转录为不对称转录? 比较真核生物RNA聚合酶的不同点。 复习与作业 * * They did the experiment in 1957 尚辅网 五、DNA复制过程 三个阶段: 起始 (Initiation ） 延伸（ Elongation ） 终止（ Termination ） 尚辅网 1 起始过程 DnaA蛋白辨认 并结合起始位点 防止螺旋回复 单链结合蛋白 解链酶、拓扑异构酶 引物合成 引物酶 DNA解链 起始点oriC的确定 复制体的形成 连接酶 尚辅网