免疫学方法检测食品中的三聚氰胺.ppt

免疫学方法检测食品中的三聚氰胺 生物工程133第一组 组员：潘姚益、赵阳、金超超、强涛、周金琪 制作人：强涛 一、认识三聚氰胺 三聚氰胺：俗称密胺、蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，被用作化工原料。它是白色单斜晶体，几乎无味，微溶于水（3.1g/L常温），可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等，不溶于丙酮、醚类、对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。 二、检测方法 酶联免疫吸附分析法 胶体金免疫层析法 酶联免疫吸附分析法 步骤：利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定。先将三聚氰胺酶标记物，样品萃取物及标准样加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30min的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，孵育30min后洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。在配制的洗液清洗结束后，每孔中加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30min后加入终止液(盐酸)，终止底物反应，在450 nm波长处检测吸光度值，根据各孔颜色深浅进行数据读取，依据标准的吸光度值得出样品中三聚氰胺的的浓度值 优点：由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度，另外特异性强。 胶体金免疫层析法 步骤：将三聚氰胺偶联抗原以条带状固定于硝酸纤维索膜上（T线）