非那甾胺醇质体(ethosomes)的体外经皮渗透研究.pdfVIP

非那甾胺醇质体(ethosomes)的体外经皮渗透研究 饶跃峰 梁文权* 郦锋 浙江大学药物制剂研究所 杭州 310031 皮肤给药是药剂学中一个重要给药方法 不管经皮吸收产生的是全身作用还是局部疗效 药物均需通过 角质层 然而 由于角质层的屏障作用 使许多药物的疗效不能很好发挥 经皮吸收促进剂 离子导入 超 声波 电穿孔等方法均被用来克服角质层的屏障作用 制备 -环糊精包合物 脂质体 纳米粒 传递体 微 乳 胶束[1,2,3] 等制剂技术亦被应用 近来 一种由磷脂 乙醇组成 具有脂质体双分子层结构的囊泡给药载 体 称为ethosomes我们译为醇质体 被用于经皮给药 醇质体可促进药物穿过皮肤 能增加药物在皮肤 [4] 中的蓄积 有文献报道由磷脂 乙醇和水组成的盐酸苯海索醇质体的稳态透皮速率与普通脂质体相 比提高了 87 倍[ 5 ] 非那甾胺(finasteride)属氮杂固醇类药物 是一种新型的 5 还原酶抑制剂 主要用于治疗良性前列腺增 [6,7] 生及男性型脱发 其分子量为373 脂溶性 日给药剂量不超过5mg 是一种较为理想的经皮给药候选药 物 本文尝试制备非那甾胺醇质体 并与脂质体 醇溶液对比研究其经皮渗透特性 1 材料和仪器 1.1 仪器 2 改良的TK-6A 型Franz 扩散池 S=2.8cm V=6.5ml 上海凯偕科技贸易公司 RE-52C 旋转蒸发仪 上 海亚荣生化仪器厂 Agilent1100 高效液相色谱仪 JY92- 超声波细胞粉碎仪 宁波新芝科器研究所 78- 1 型磁力搅拌器 江苏金坛市江南仪器厂 THZ-8Z 型恒温振荡器 上海实验仪器厂 1.2 试剂与材料 非那甾胺 仙居制药有限公司 注射用大豆磷脂 Lipiod 公司 德国 甲醇 HPLC 级 浙江临海浙东 特种试剂厂 PEG400 杭州常青化工有限公司 其它试剂均为分析纯 2 实验方法 2.1 非那甾胺分析方法 色谱条件 色谱柱 AgilentXDB-C18 15cm 4.6mm 流动相 甲醇-磷酸缓冲液(75:25) 流速 1ml· min-1 检测波长 230nm 柱温 40 进样量 20ìl 灵敏度 0.01AUFS 2 -1 采用峰面积定量法测得样品标准曲线为 y=13.4320x+0.0523R=0.9999线性范围 0.4~20µg·ml 日间差3% 回收率为99.4 2.2 样品的制备 通讯作者 梁文权 男 教授 博士生导师 Tel:0571 e-mail: wqliang cmm.zju.edu.cn 2.2.1 醇质体的制备 精密称取非那甾胺 30mg 和大豆磷脂 300mg 用 3.8ml 乙醇溶解 置于磁力搅拌器上 在密闭条 件下边搅拌边缓慢细流注入 6.8ml 缓冲液 注完后继续搅拌 5分钟 然后在冰水浴条件下探头式超声 400W,30次 最后过 100nm微孔滤膜 将得到的样品冷藏 备用 2.2.2 脂质体的制备 采用薄膜分散法 取非那甾胺与大豆磷脂用适量氯仿溶解后置于梨形瓶中 旋转蒸发除去有机溶剂 用 缓冲液脱膜 分散 定容 过膜 冷藏备用 2.2.3 其它样品的制备 配制非那甾胺30 乙醇饱和溶液 并以水饱和溶液作为对照 2.3 透射电镜观察样品形态 将由上述方法制备得到的非那甾胺醇质体和脂质体样品稀释适当的倍数 用磷钼酸负染色法染色后 置 于电子显微镜下观察样品的大小及形态 2.4 体外经皮渗透 取去除皮下组织的人体皮肤 用生理盐水洗净后 将皮肤固定在改良的Franz 扩散池上 用20% 的PEG400 生理盐水为接受介质 在供给室加入适量先前制备的样品 并密封 于设定的时间点取样 并立即补充等量 新鲜接受液 24 小时时 取下皮肤 用水清洗擦干 并用酒精棉球擦拭皮肤表面数次 热板法分离皮肤的表 皮层和真皮层 分别捣碎 用乙醇提取24 小