近交系红鲫生化遗传标记的研究.pdfVIP

论文汇编 第六届中南地区实验动物科技变流套 近交系红鲫生化遗传标记的研究术 江-t-iR，吴端生，余坚，练高建，姚峰，谭翔文．刘鑫 (南华大学实验动物学部，湖南衡阳421001) 【摘 要】目的 建立近交系红鲫生化遗传标记。方法 采用聚丙烯酰胺梯度凝胶 垂直电泳法，分析近交系红鲫与普通红鲫的苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶 (SOD)等同工酶。结果红鲫血清蛋白电泳可分离25条以上蛋白带。其中，靠近阳极的 c区段约有14条谱带；靠近阴极的A区段在近交系红鲫有着色深的SP-A1谱带，但不见 有SP—A2、SP—A3；B区段具有8条谱带，在近交系红鲫则均具有着色深的sP—B7和SP- B8，而缺少SP-B2。6尾近变系红鲫和4尾普通红鲫的MDH同工酶电泳谱带为3条，且带 型一致；2尾普通红鲫的MDH同工酶电泳谱带为5备。近交系红鲫的SOD同工酶电泳谱 带为8条，普通红鲫的为6奈，近交系红鲫比普通红鲫在SOD一3、SOD-8多出两条带，两 种鱼各自的带型一致。结论两种红鲫血清蛋白电泳可分离出25条以上蛋白带。近交系 3、SOD-8电泳谱带可以作为近交系红鲫的生化遗传标记。 【关键词】近交系红鲫；同工酶；遗传标记 aniTa|usred 红鲫(Carrassius variety)既是一种优良的养殖鱼类，也是一种美丽的观赏鱼类，作为 实验动物更是具有对毒物敏感等优点，在急性毒理实验、水环境重金属污染和农药杀虫剂污染监测 等领域有重要的应用价值。本实验室采用雌核发育技术，培育了一批近交系红鲫“】。为了进一步建立 其遗传概貌，并为长期保持该品系不发生遗传漂变提供检测标准，本论文分析了近交系红鲫的血清 蛋白和苹果酸脱氢酶(MDH)及超氧化物歧化酶(SOD)等同工酶，建立了生化遗传标记。 1材料与方法 均体重1069，从本实验室自建的保种群中提供。 1．2方法 1～21 同工酶电泳分析参照朱蓝菲报道的方法01进行取样、电泳分析和固定染色。从鱼尾 静脉取血，加入氯化钠溶液洗涤、离心，收集红细胞，加入去离子水和甲苯溶液并震荡，破碎 +湖南省卫生厅资助项目(B2005095)。 第卉届中南地区实验动物科技交流套 论文汇编 红细胞，收集红细胞裂解液，置于一20℃冰箱中保存备用。采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直平板电 的凝胶酶带通过美国UVP凝胶成像分析系统进行扫描。酶带按条带泳动从慢到快依次命名为 1，2，3·…“。 聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直平板电泳法分离血清蛋白，考马斯亮蓝R250显色。 2结果 2．1血清蛋白为便于分析，将红鲫血清蛋白电泳图谱分为A、B、C等3个区段，共有25条以上蛋白 带。其中，靠近阳极的c区段约有14条谱带。靠近阴极的A区段在普通红鲫有l-2条清晰谱带，命名为 (图1-2)。 (MDHl4、MDH一5)。 2．3超氧化物歧化酶(SOD)红鲫红细胞SOD同工酶的电泳酶谱可大致分为两个区段，上一区段存 在一条每一个体都表达的基础酶带，下一区段中，普通红鲫均有5条带，近交系红鲫均有7条带，普通 红鲫和近交系红鲫内部各酶谱完全一致(1—2)。 图1—1 普通红鲫(W1一W6)和近交系红鲫(H1—1-16) 血清蛋白电泳图谱(图中A、B、c分别代表3个区段) 1-1 ofSelyllm inwild(W1一W6)and Fig Eleetrophoretogramproteins inbredstain auratusred of(H1一H6)earassius 论文汇编 第六届中南地区实验动物科技交流套 ml一2普通红鲫(Wl—W6)和近交系红鲫(H1一H6)血清蛋白电泳图谱B区段 SectionBof ofser