三叶半夏脱毒快繁和多倍体诱导研究.pdfVIP

中国植物病理学会2007年学术年会论文集 N／三叶半夏脱毒快繁与多倍体诱导薪究 张雪，王海丽，申屠苏苏，陈集双。 (浙江理工大学生物工程研究所，杭州310018) ternata Briet)为天南星科多年生宿根草本植物。半夏块茎有多种药用功 摘要：半夏(Pinellia 能，如燥湿化痰、抗肿瘤和降血脂等多种重要作用。然而，由于盲目挖掘和缺乏管理，野生资源 不断减少。人工栽培是其必然趋势。但人工栽培的半夏普遍存在品质不均、由病毒侵染和病害严 重而造成的品质衰退、单株后代繁殖速度低等问题，制约了半夏的产业化进程。 关键词：三叶半夏；病毒检测；脱毒快繁；离体决茎；多倍体诱导 mosaic mosaic virus，SMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber 毒(Soybeen 酶切克隆，从半夏上获得了CMV分离物(CMV-PGs)的全长基因组序列。序列同源性分析结果表明： 的CIVIV分离物明显形成一个独立的分枝。在氨基酸水平上，半夏分离物的CP和3a也都分别形成了独立 的分枝。上述结果也表明半夏来源的CMVCP基因所承受的选择压力要高于3a基因。 将侵染半夏的7个SMV分离物的CP基因与分离自大豆和半夏的SMV、分离自其他天南星科植物的 mosaic DsMV以及侵然葫芦科的西瓜花叶病毒(Watermelon 析。结果表明：侵染半夏的SMVCP基因核苷酸同源序列具有较高的寄主相关性和部分地域相关性，寄主 结果。 以三叶半夏为材料进行脱毒快繁研究。以茎尖为外植体对带毒植株进行脱毒处理时，0．2nun以下的茎 尖分生组织进行培养是获得三叶半夏脱毒苗的有效方法。以获得的脱毒苗为基础，研究了三叶半夏离体块 茎形成的部分影响因素，正交试验结果显示蔗糖及多效唑是影响半夏离体块茎形成的关键因子，50g／L蔗 糖+O．5 mgrL钟A+O．5rngrLPP333+0．05gn。AC是诱导离体块茎的最佳组合。离体块茎可有效对接三叶半 夏脱毒快繁与大田生产。通过丛生芽快繁和离体块茎栽培，脱毒半夏年繁殖系数可以达到1：140000，达 到产业化水平。 以秋水仙素为诱变剂，以三叶半夏叶片诱导的愈伤组织、丛生芽和茎尖为材料，采用混培法和浸渍法 项目来源：863项目(2002AA241121)资助 -252． 病毒及病毒病害 进行多倍体诱导。以叶片诱导的愈伤组织为材料时，采用混培法，秋水仙素浓度为0．05％时诱导率最高； 以茎尖为材料时，采用混培法，秋水仙素浓度为0．007％时诱导率最高；以丛生芽为材料时，采用浸渍法， 秋水仙素浓度为0．05％，处理时间为12h，诱导率最高。人工诱导的多倍体半夏植株矮小粗壮，光合效率 高，离体块茎直径和鲜重增加，生长势更强，有望生产更高品质和更高产量的半夏药材。