雄性不育烟草花蕾发育过程中膜脂过氧化的研究.pdfVIP

√雄性不育烟草花蕾发育过程中膜脂过氧化研究 刘齐元1，崔爱花1，朱肖文1，彭耀东2，李立新2 (1江西农业大学农学院，南昌330045；2江西省烟叶科学研究所，南昌330045) 以4对烟草雄性不育系及其保持系为材料，即MS革新3号与革新3号、MS31与 suaveolens，测定了 (Nicotianatabacum)，后1个不育系胞来源于野生种烟草Nicotiana 各材料花蕾发育过程中活性氧自由基O一2·、丙二醛(MDA)及细胞质膜透性(以相对 电导率表示)的变化。每个材料选取不同发育进程的花蕾，按可育雄蕊花药发育时期分 别四分体时期、单核～单核靠边期、二核期对应的花蕾分为小蕾、中蕾和大蕾三组。 活性氧自由基O一2·的测定采用盐酸羟胺法，根据样品与羟胺反应的时间和样品中的 亮蓝法。丙二醛(MDA)的测定采用硫代巴比妥酸法，用双组分光光度法计算样品提 DW)。 取液中MDA的浓度，根据MDA的浓度的所取样品的干重计算其含量(1amol／g 相对电导率的测定：取O．59花蕾于20ml刻度试管中，加入纯水至刻度处，真空抽气两 次后测定其电导率；然后沸水中煮15mira，冷却后补水至刻度再其测电导率，相对电导 率(％)=(第一电导率值／第二次电导率值)x100。 烟草花蕾中活性氧自由基(0-2)含量的测定表明，花蕾中活性氧自由基(O一2·) 含量在1．0一-1．7 nmol／min／mgprotein范围内。所有不育系花蕾在发育过程中的O一2·含量 都比其相应的保持系高：小花蕾为保持系的102．31％～109．06％，中花蕾为保持系的 量都表现出较一致的规律，即在小花蕾阶段，O一2·含量较高；中花蕾阶段，O一2·含量有 所下降；而大花蕾阶段，O一2·含量则显著升高，但材料革新3号例外，即其在大花蕾阶 段仅略有升高。 DW范围内。所有 测定结果表明，所有花蕾中MDA的含量在0．0110．0201maol／g 不育系小、中、大花蕾的MDA含量都比其保持系对应花蕾更高：小花蕾为保持系的 114．06％。表明不育系花蕾的细胞质膜的过氧化程度比保持系高，从而积累了相对较多 的MDA。此外，每个材料的MDA含量都是由小蕾、中蕾到大蕾逐渐上升，以大蕾中 的MDA含量最高。 相对电导率可以用来表示细胞质膜透性的大小。烟草不同大小花蕾相对电导率的测 定结果表明，所有不育系花蕾的相对电导率都比其保持系大：小花蕾为保持系的 163．57％。表明不育系花蕾的细胞质膜受到了较大的损伤，细胞内电解质外渗量增大。 尤其在小花蕾阶段，4对材料中有3对材料的不育系花蕾相对电导率比其保持系明显增 花蕾的相对电导率有较快下降的趋势，而保持系小、中、大花蕾的相对电导率变化较平 稳。这说明不育系花蕾细胞质膜受到的损伤在小花蕾时期较大，而后逐渐适应；到大花 蕾时期，已和保持系非常接近。 不育系花蕾中活性氧自由基(O一2)和丙二醛含量比保持系高，相对电导率也大。 烟草雄性不育系在花蕾生长发育期间，活性氧自由基的产生速率比其保持系高，这可能 是不育系花蕾积累丙二醛较多的原因；较多的丙二醛含量又使细胞膜受损增大，导致相 对电导率明显高于其保持系。这些变化可能会影响不育系雄性器官的发育，并最终导致 雄性不育。 78