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生物传感器xy.doc

多功能生物传感器:能够测定两个以上或综合指标的生物传感器。如滋味传感器、味觉传感器、鲜度传感器、血液成分传感器等。 BOD(生化需氧量):在有氧条件下,好氧微生物氧化分解单位体积内水中有机物所消耗的游离氧的量。表示单位为氧的毫克/升(O2,mg/L) LB膜:许多生物分子(如脂质分子和一些蛋白质分子)在洁净的水表面展开后能形成水不溶性液态单分子膜,小心压缩表面使液态膜逐渐过渡到成为一个分子厚度的拟固态膜。 酶电极:是最早出现的生物传感器,由固定化酶和基础电机组成。 直接免疫电极:蛋白质分子(抗原或抗体)携带有大量的电荷,当抗原抗体结合时会产生若干电化学变化(电学变化),涉及参数包括介电常数、电导率、膜电位、离子通透性、离子淌度等。检测这些参数中间的一种,便可直接测得免疫反应的发生。 间接免疫电极:利用标记物将免疫反应的信号放大后,间接地测定抗原或抗体这类电极称为~。 亲和生物传感器:以分子之间特异识别并结合为基础的生物传感器(免疫传感器、酶PZ生物传感器、SPR生物传感器为代表)。 微生物外源呼吸:指微生物细胞对底物的好氧代谢,是在有氧条件下微生物细胞对外源物质的氧化和固化过程,以微生物细胞对氧的消耗或CO2的产生微监测指标,是微生物生理学的重要研究内容。 同化实验:测定某种微生物对待测底物的利用能力,是分类微生物学和应用微生物学的重要基础试验。 电化学生物传感器:是以电化学传感器作为基础电极与生物活性材料组成的生物传感器,简称生物电极。 生物组织电极:以活的动植物组织作为分子识别元件。 1.适合生物传感器的常用固定化方法分为六种:夹心法(隔离法)、包埋法、吸附法、共价结合法、交联法和微胶囊法。 2.DNA电化学传感器有多种类型,根据作用原理不同,可以分为5大类:直接DNA电化学,间接DNA电化学,特异性氧化还原指示剂型,DNA介导的带电传输,纳米颗粒电化学放大。 3.稳态法测定过程中可以观察到响应全过程的3个阶段:初始阶段、混合响应阶段、零级响应阶段。 【微生物电极的特点】 答:优点:(1)获取微生物细胞比获取酶容易得多。酶的提取和纯化的成本比较高,大多数酶至今尚未能提纯。(2)微生物细胞是极其丰富的酶源,而且细胞膜系统本身就是最适宜的酶活动的载体,通过特定方法维持细胞活性,可以保持长时间的酶活性。(3)由于调动整个细胞或部分酶体系参与反应,催化过程有可能在细胞内循环,信号得以放大,因此,微生物电极的灵敏度比相应的酶电极的高。不足:(1)多酶体系的存在,有可能对复杂样品产生非特异性响应(2)维持细胞活性是一个精细的过程,然而常常由于缺乏足够的经验而导致细胞过早的死亡,生物传感器的工作寿命因此而受到影响(3)微生物电极的保存和复活都比较困难,且通常的微生物保存方法有一定死亡率,会导致生物传感器活性下降(4)以全细胞为灵敏元件的微生物电极测定过程受到多种因素影响,因此微生物电极测定的精度和重复性一般比酶电极差。 【怎样检测环境中的致变物(2种)】 答:第一种:用枯草芽杆菌作为工作菌株。已知枯草芽杆菌野生型菌株(Rec+)的DNA受到的化学损伤能通过分子重排而得到修复,因而能照样繁殖。丧失这种自我修复能力的菌株称为缺失型(Rec-)。Rec-菌株的DNA受到化学损伤后因失去繁殖能力而致死。将Rec+ 和Rec- 菌株分别固定在一对氧电极表面。将这对微生物电极插入含有葡萄糖的反应池中,待细胞外源呼吸稳定后,电极输出稳定电流,加入强致癌物质AF2, Rec-电极的电流缓慢上升,这意味着Rec-株DNA损伤,菌体逐渐死亡,而此时Rec+电极的电流值几乎保持不变。由差式呼吸法在20~60min内可以确定加入样品是否含有致突变物质,而且可以根据呼吸差值来判断致突变物质对DNA损伤的能力大小。 第二种:利用鼠伤寒沙门菌(TA100)作为工作菌株。TA100是组氨酸缺陷型,利用his-菌株的回复突变性能来检测物质的致突变性,若营养中不含his, his-菌株不能繁殖,但当致突变物质作用于DNA时,在菌株DNA特定部位发生基因回复突变而成为野生型(his+),此传感系统反应时间为9~10h,对AF2的检出下限为1ug/ml。例如:将his-菌株包埋在pH电极表面,由致突变物质使his-转变成his+,回复子缺乏甲酸氢裂合酶造成甲酸在菌体中的积累,于是由质子引起pH电极的电位变化。 【共价键合法固定酶敏感膜如何保护活性中心】 答:有效保护活性中心的方法有两种:(1)在共价反应之前加入酶的底物或底物结构类似物或竞争性抑制剂,将活性中心保护起来。(2)结合使用共价反应的化学选择性和生物特异性异源双功能试剂。这种双重选择性在某些条件下不仅能保护蛋白质活性部位,还可能实现酶分子的定向固定。 【如何利用培养基阻抗变化与细菌变化设计阻抗传感器】 答:微生物反应

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