生物化学技术与实验室管理大题.doc.docVIP

方法比较实验如何设计？结果如何进行统计和分析？ 目的：检测候选方法的系统分析误差，包括比例和恒定系统误差。设计：对40-100例病人的标本用候选方法和对比方法同时进行分析测定，最后观察两者之间的差异。 统计和分析：①做散点图—提供研究的初步结果②进行直线回归分析 y a+bx；X—对比方法测定结果 ， y—候方法的后升值，回归直线的截距a表恒定误差，回归系数b比例误差③作相关分析 酶偶联测定法中，常用的指示酶有哪些？常监测的指示反应是什么 乳酸脱氢酶LDH、过氧化物酶POD，NAD P +或NAD P H偶联的脱氢酶及其指示反应；偶联H2O2的工具酶及其指示反应 什么是层析法？层析法是如何分类的 是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同，是它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。按分离原理分为分配层析法、吸附层析法、离子交换、凝胶、亲和层析法；按固定相和流动相所处状态分为气液、气固、液液、液固层析法；按操作形式不同分为纸层析法、薄膜、薄层、柱层析法 何谓光谱分析技术？可分哪几类？他有什么特点？ 是指利用各种化学物质（包括原子、基团、分子以及高分子化合物）具有吸收、发射或散射光谱浦西的特点，对物质进行定性或定量分析的技术。 分为吸收光谱分析、发射光谱分析和散射光谱分析。 灵敏度高、精密度和准确度高、选择性较高、仪器设备简单、操作易掌握、用途广泛 什么是内标法？如何选择内标物 分析时准确称取试样W内含待测组分mi，精确加入一定量某纯物质ms做内标物，进样并测出峰面积Ai和As，按公式计算组分i的百分含量。 纯度要高，结构与待测组分相似，内标峰要与组分峰靠近但能很好分离，内标物和被测组分的浓度相接近 影响荧光强度的因素有哪些 （1）溶剂：增大溶剂的极性将使电子跃迁的能量降低，荧光增强（2）溶液的ph值：当荧光物质本身为弱酸或弱碱时，溶液ph值改变将对溶液的荧光强度产生较大影响（3）温度：温度升高，荧光强度降低 根据反应时间不同，目前酶活性的测定方法分哪两类？解释两类方法并对两类方法做出评价 定时法和连续监测法，定时法是测定酶反应开始后某一时间内产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法，连续监测法指连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化来求出酶反应速度的方法 定时法评价；优点是简单，无需保温装置，显色剂的选择也可不考虑对酶活力的影响，缺点是如果不用预实验确定，无法了解酶作用的这段时间内是否都是零级反应：连续监测法评价；优点是可动态观测酶促反应进程，容易找到线性期，结果准确可靠，适合自动化分析仪，缺点是要求精确控制温度ph值和底物浓度等反应条件，仪器需要具有恒温装置及自动监测功能 自动生化分析仪常用的分光系统主要有哪两种？各有何优缺点？目前多采用哪种？ 前分光和后分光。 前分光的光路是光源→分光元件→样品→检测器，前分光一般不可以进行不同波长项目的不间断检测，通常只能单项一次测完后，再测第二项： 后分光的光路是光源→样品→分光元件→检测器，即光源光线直接透过样品，通过光栅，再进行吸光度的检测。使用后分光技术，可以在同一体系中测定多种成分。无需移动仪器的任何部分，噪声低，分析精确度和准确度高，故障少。后分光可以连续不断检测不同波长的反应，但光强度过高时可引起血清胆红素降低 目前全自动生化分析仪多采用后分光，半自动生化分析仪也有少数采用后分光原理 试述聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点 1.具有分子筛作用；2.样品用量少，设备简单；3.不带电荷，几乎无电渗作用；4.可通过控制凝胶浓度控制调节凝胶的孔径；5.化学性质好；6.机械强度好 何谓roc曲线？如何绘制 即受试者工作特征曲线，通过将连续变量设定出多个不同的临界值，从而计算出一系列敏感度和特异度，再以敏感度为纵坐标，1-特异度为横坐标绘制而成 绘制方法：根据专业知识，对疾病组和参照组测定的结果进行分析，确定测定值的上下限，组距及截断点，按选择的组距间隔列累积频数分布表，分别计算所有截断点的敏感性，特异性和假阴性率（1-spe），以sen为纵坐标，代表真阴性率，以（1-spe）为横坐标表假阳性率，绘图成Roc曲线 影响朗伯比尔定律的因素有哪些 成立条件：1.入射光为单色光。2.稀溶液影响因素：1.非单色光的影响。2.溶液本身的物理化学因素影响。①溶液浓度影响②介质不均影响③溶液发生化学变化 何谓荧光效率？要发生荧光，分子必须具有怎样的荧光效率 荧光效率：物质产生荧光的能力，指激发态物质发射荧光的光子数与基态分子吸收激发光的光子数之比。 分子必须有较高的荧光效率才可发出荧光。 高效液相色谱法定量测定主要有哪些方法 归一化法，内标法，外标法，内加标准法 全面质量控制过程分那三个阶段？简述其主要内容 标本分析前的质量保证、分析中的质量控制、分析后