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胱硫醚-β-合成酶在年轻和老年大鼠海马中的表达分布_医学论文 胱硫醚-β-合成酶在年轻和老年大鼠海马中的表达分布_医学论文 作者：刘磊 乔伟丽 祁友键 徐红 闫长栋 【摘要】 目的探讨硫化氢(H2S)合成酶胱硫醚-β-合成酶(CBS)在海马中的分布和表达是否受年龄因素的影响。方法用免疫组化和免疫印迹方法观察年轻(3月龄)和老年(24月龄)大鼠海马中CBS的分布和含量。结果CBS在年轻和老年大鼠海马中主要分布在颗粒细胞层和锥体细胞层，呈区域性分布，其中CA1区表达最多，CA3区、DG区表达较少CBS在老年大鼠和年轻大鼠海马中的表达和分布没有变化。结论CBS在大鼠海马中呈区域性分布，CA1区表达最多，年龄不影响CBS的分布和表达。 【关键词】 硫化氢胱硫醚-β-合成酶海马 　Abstract： ObjectiveTo explore the correlation between the distribution and expression of hydrogen sulfide (H2S) synthase cystathionine-β-synthase (CBS) in the hippocampus of young (3 months) and aged (24 months) rats. MethodsThe distribution and expression of CBS in the hippocampus of young and aged rats were determined by immunohistochemistry and Western blot analysis. ResultThe expression of CBS showed a regional distribution in the hippocampus of young and old rats, in which CBS was highly expressed in CA1 area, and much less expressed in CA3 area and DG area. Compared with young rats, there was no variation in the expression of CBS in hippocampus of aged rats. ConclusionThe expression of CBS showed a regional distribution in the hippocampus of young and old rats and had the top level of expression in CA1 region, with age factors unrelated in the distribution and expression of CBS. 　　Key words: hydrogen sulfide cystathionine-β-synthase hippocampus 　　众所周知，硫化氢(H2S)是一种具臭鸡蛋味的毒性气体。然而，1989年Warenycia等[1]在鼠、牛及人的大脑中发现有相对较高浓度的内源性H2S (50~160 mmol/L)，提示H2S可能具有重要的生理作用。大量的研究表明内源性H2S在神经系统、消化系统、心血管系统等均有重要生理作用，并参与了一些疾病的病理生理过程，被认为是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后的第3类气体信号分子[2]。内源性H2S主要由胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase，CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase，CSE)和半胱氨酸转移酶催化半胱氨酸生成。CSE和CBS的表达具有组织特异性，其中CSE存在于心血管组织中，而CBS 主要存在于神经系统内[3-4]，参与中枢神经系统功能的调节。但是，CBS在脑中的表达和分布如何，衰老是否会引起脑组织中CBS的改变，目前网上查阅尚未见报道。本研究通过免疫组织化学和免疫印迹方法，探讨H2S合成酶CBS在年轻和老年大鼠海马中的分布情况以及衰老对CBS表达的影响。 　　1材料和方法 　　1.1主要试剂抗CBS抗体购于武汉博士德公司，山羊抗兔二抗、SP-6001免疫组化检测试剂盒、DAB显色试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司，NBT/BCIP试剂盒购于Promega公司，其他试剂均为国产分析纯级。 　　1.2动物与分组清洁级雄性SD大鼠：年轻组(n=20)，3月龄，体重200~250 g老年组(n=20)，24月龄，体重550~650 g。大鼠由徐州医学院实验动物中