黄曲霉毒素检测技术的研究进展.pdfVIP

食品研究与开发 2006．V0127。NO．4 0．32、Bl0．036、G，0．78、硅胶色谱纯化再进行两次展开，起最低检出限为0．3 性投服的LD50(m眺g)为M1 B21．70、G2 2．45、M：12．0。最小毒剂量为2斗∥只。ng，回收率在灵敏度为o．1斗g，kg时，可达到80％， 此方法最常用。 1．8鳟鱼实验给鳟鱼饲喂黄曲霉毒素经4～20个国标法仍为薄层色谱法，其检出限为0．04斗g／b。 月便可出现明显的肝癌病变。B。和G。的LD卯为2．2液相色谱法 O．5～1蝉江g。此实验比较确实、常用。 1．9植物实验黄曲霉毒素有抑制某些植物发芽 谱法作为检测黄曲霉毒素M，含量的方法，该法用 的作用，而且使植物叶片失去叶绿素而变成黄色 色谱柱色谱代替原方法的纤维素色谱进行净化处 或白色。如20斗咖L的黄曲霉毒素B。可抑制水理，丙酮提取液用醋酸铅处理后经乙烷脱脂，再用 芹的发芽，10斗咖L时可使幼芽叶子完全失去 三氯甲烷萃取，过Sep—Pak色谱柱，黄曲霉毒素M。 叶绿素，1斗咖L时可使叶的边缘出现变白的现 被三氯甲烷一甲醇溶液洗脱，用连接荧光检测器的 象。 c，。反相液相色谱方法测定其含量，在牛奶中添加 1．10其他实验利用其他的动物如大白鼠、小白鼠、 025、o．5和1．0 豚鼠、地鼠和猴子也可以进行黄曲霉毒素的饲喂实 和94．1％，牛奶和猪奶中的黄曲霉毒素M。的检出 验，观察死亡及肝癌病变的过程，同样可以鉴定出 限均小于O．1 n∥mL。 黄曲霉毒素【1】。 2．3高效液相色谱 2 AFT的定量检测方法 高效液相色谱法作为灵敏度高、特异性强的方 黄曲霉毒素的定量测定方法分为两大类，一类 法，被广泛用于黄曲霉毒素M．的测定中。国内外的 是建立在色谱基础上的理化分析方法，其中包括了 报道大多数采用反相色谱，用c豫柱作固定相。 传统应用荧光检测的薄层色谱法(TLc)、液相色谱 法(LC)、高效液相色谱法(HPLC)、以及近年来新发干牛奶中黄曲霉毒素M，的测定方法，该法仍保留 展的质谱检测(MASS)；另一类为快速测定的免疫三氯甲烷提取，但用液一液萃取代替柱色谱，并将 化学法，如放射免疫测定法(RIA)和酶免疫测定法 (EIA)。 霉毒素Mh(其荧光强度为黄曲霉毒素M。的6～7 2．1薄层色谱法 倍)用荧光检测器检测。方法检出限为O．014 mg，L 薄层色谱法是最早建立的用于检测乳和乳制 {12】。carisano等使用Sep—PakC，8对牛奶进行AFM。 品中黄曲霉毒素M．含量检测的方法，并为AOAc分离和净化，作为HPLC试样前处理方法，大大提高 所采用。虽然薄层色谱法的灵敏度相对较差，但由 了方法的灵敏度，检出限为ln舡，线性范围为 于提取和纯化方法的不断改善和多种系统和显色 2．4～50 剂的应用，使该法具有了较好的分离和专一性。国 此外，HPLc方法还被广泛地应用于奶粉、干酪等乳 内外对建立AFYr测定的薄层色谱法有大量的报道， 制品中黄曲霉毒素M．的含量测定。 schuller等建立的方法检出限为0．05斗g，kg，回收2．4质谱法 率为98％翻；Tuins妇和Bronsgeest将其检出限提高蹦edli建立了质谱法测定，其中黄曲霉毒素M。 到0．04斗g／l【g【8】，Stub埔eld建立的方法虽然没有达的检出限为100 pg并提取对试样进行简单的净化， 到上述水平，其检出限是0．1斗非