银杏叶微波提取物清除DPPH自由基的工艺研究_药学论文.docVIP

银杏叶微波提取物清除DPPH自由基的工艺研究_药学论文 银杏叶微波提取物清除DPPH自由基的工艺研究_药学论文 【摘要】 　　目的研究银杏叶中抗氧化活性物质的最佳提取工艺。方法应用微波辅助提取法提取银杏叶抗氧化活性物质，以清除DPPH自由基的IC50值为活性跟踪指标，采用正交实验对浸提条件进行了优化。结果最佳提取工艺为：微波辐射时间20 min，乙醇体积分数70%，固液比1∶20(g：ml)，提取温度50℃。 结论按此优化条件进行提取，平均IC50值为1.29 μg/ml，银杏总黄酮得率可达到3.1%。 【关键词】 正交实验 微波提取 银杏叶 抗氧化活性物质 　　Abstract：ObjectiveTo study the optimum extraction process of antioxidative substances from Ginkgo biloba leaves. MethodsMicrowave assisted extraction (MAE) was used to extract antioxidative substances from Ginkgo biloba leaves. The extraction conditions of antioxidative substances from Ginkgo biloba leaves were studied by orthorhombic analysis and IC50 of scavenging DPPH free radical was used as the activity monitoring parameter.ResultsThe optimum extraction conditions were:20 min, extraction time, 70% ethanol at 50℃, and a material/solvent ratio of 1:20(g:ml).Conclusion Under this condition, IC50 of scavenging DPPH free radical of antioxidative substances from Ginkgo biloba leaves is 1.29 μg/ml while the yield of flavonoids of Ginkgo biloba leaves is 3.1%. 　　Key words：Orthogonal test method; Microwave assisted extraction; Ginkgo biloba leaves; Antioxidative substance 　　近20年来，活性氧和自由基研究成为现代生命科学的热点，评价和筛选具有强抗氧化活性的天然资源已成为生物学、医学和食品科学研究的新趋势。银杏作为我国特有的树种资源，因其全身的药用价值而得名，目前的研究主要集中在银杏叶的开发和利用上。银杏叶提取物化学成分很复杂，主要活性成分为黄酮类化合物及萜类内酯,此外,还有有机酸、烷基酚和烷基酚酸氨基酸、单宁、甾体化合物及微量元素等［1，2］，具有较强的清除自由基和抗氧化作用，是开发天然抗氧化剂的重要来源。 　　微波技术是近20年来国内外迅速发展的新技术，其在植物提取方面的应用已有多项专利授权［3］，由于其特殊的加热机制可以在很大程度上缩短提取时间［4］，同时还可以减少溶剂的消耗等优点而广泛应用于传统中药黄酮类［5］、皂苷类［6］、多糖［7］以及挥发油等［8］活性成分的提取研究。然而，目前大多数的研究主要集中在天然产物活性成分的得率上，以抗氧化效果为提取考察指标的研究较少。作者以清除DPPH自由基的IC50值为活性跟踪指标，采用正交实验法对银杏叶抗氧化活性物质进行微波辅助有机溶剂提取，考察了微波辅助提取的条件，优选出了银杏叶抗氧化活性物质的最佳浸出方案。 　　1 器材 　　MAS－I型微波萃取仪（上海新仪微波化学科技有限公司）；电子天平（梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司）；循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）；UV－1201紫外分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）。DPPH，Sigma公司产品；芦丁标准品；其它药品试剂均为分析纯；水为实验室自制新鲜蒸馏水。银杏叶（采购于长沙市药材市场）买回后叶片与叶柄分开，叶片在烘箱中50℃烘至手捏碎，粉碎，过40～80目筛备用。 　　2 方法 　　2.1 标准曲线的绘制精确称取无水芦丁对照品20 mg于50 ml容量瓶中，用30%乙醇定容，再移取25ml芦丁溶液至另一个50 ml容量瓶中，用30%乙醇定容。分别移取上述溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0