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生物技术 2008年18(5) 选用常温20℃。 分子量约为37000Da,李泉从马铃薯中提取的蛋白酶A抑制剂 2.3超声波破碎后粗抑制剂的组分分析 分子量约为18000Da,而该云芝胞内胃蛋白酶抑制剂的分子量 约为23 对云芝发酵液经超声破波碎后所得粗抑制剂进行组分分 442Da;前两种抑制剂主要对蛋白酶A起抑制剂作用, 析。 而该抑制剂对胃蛋白酶和蛋白酶A都有很强的抑制活性;组 表2超声波破碎后粗抑制剂的组分分析 分分析表明,超声处理后粗抑制剂的主要成分为蛋白质和糖, Tab.2 of 0fcrude edl inhibitor吐日uhra.酬e Analysiseomponelats disnJpt;∞ 二者的比例约为O.79,对胃蛋白酶的I‰约为2.16mg/mL。 蛋白质/糖 O.7929 对胃蛋白酶抑制单位(rU/mL) 5.47 Ic∞(,wCmL) 2.1644 超声波细胞破碎后,粗抑制剂的主要成分为蛋白质和糖, 二者的比例约为0.79,对胃蛋白酶的抑制率达54.7n70,对胃蛋 白酶作用的IC∞值约为2.16meCmL。 2.4 AcA54分子筛层析法测定胃蛋白酶抑制剂的分子量 用牛血清白蛋白(Mr=68000)、鸡卵清蛋白(Mr= 45ooo)、胃蛋白酶(Mr=35000)、胰蛋白酶(Mr=23300)为标 准样品,并以洗脱体积Ve对lgMr做图得AeA54分子量标准曲 线。由抑制剂的洗脱体积算出其分子量。 loCMr 图5 UltrogeiAeA54的标定及抑制剂分子量的测定 经测定得抑制剂的洗脱体积Ve—115mL,由上图计算得 Calibl蚯oll l舡一4.37,Nr,=23442。 Fig.5 0fUlma嘲elAeA54“moleadarweight hibitor 3讨论 参考文献: 超声提取技术是利用超声波瞬间产生强烈的振动、很高 [1]田亚平.生化分离技术[M].北京:化学工业出版社.2006,7. 的加速度、强烈的空化效应及搅拌作用等,使细胞破裂,从而 [2]徐志祥,李剐.苯酚一硫酸法测定灵芝多糖含量的条件研究[J]. 将胞内有效成分释放出来。由图1—4看出,超声时间对抑制 食用菌。2000,(3):6—8. 剂的提取影响最大,过短或过长都不利于抑制剂的提取;温度 [3]齐香君,苟金霞,韩戌捃,等.3,5一二硝基水杨酸比色法测定溶液 的影响最小。可能是因为所提取的抑制剂温度稳定性比较好。 中还原糖的研究[J].纤维素科学与技术,2004,12(3):19—30. 根据实验初步确定云芝胞内胃蛋白酶抑制剂的最适超声提取 [4]田亚平,王宇,周楠迪.大豆蛋白酶A抑制剂的提取和性质初探 [J].食品与发酵工业,2002,29(1):27—31. 条件为:超声时间lOmin、超声功率300W、处理量40ral、超声温 度20q

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