磁性微粒为载体的有机磷农药标记物合成初步探究.pdfVIP

第五届中国北京国际食品安全高峰论坛 磁性微粒为载体的有机磷农药标记物合成初步探究 付彦1，盂超1，刘涛，喻本红，秦静，刘幸，朱雨田，刘晓字 (华中农业大学食品科技学院，湖北武汉430070) 摘 要：本文以氨基末端磁性微粒为栽体。将活化后毒死蜱通过酰胺反应合成用于检测毒死蜱跟具有二乙氧基鲒构的 一类有机磷农药的标记物。试验表明得到的标记物具有较好的稳定性，而且具有较高的抑制鲁米诺化学发光的能力， 为进一步建立化学发光免疫分析检测有机磷农药奠定了一定基础。 关键词：毒死蜱；有机磷；标记；合成 有机磷农药是一类广谱高效杀虫剂，至今 用于酶的固定化【4】、靶向药物载体【5】、细胞分 仍是世界上生产和使用最多的农药品种，近年 选【6】、免疫检测【刀及蛋白与核酸的分离纯化、 来仍有一些新品种投放市场【I】。据调查，有机 杂交检测等领域【引。 磷农药在市场上占有重要的份额，其大量使用 结合CLIA与磁性微粒的优点，本文尝试 必然会带来农产品农药残留超标，引起急性中 合成了以磁微粒为载体的毒死蜱及二乙氧基膦 毒，对人、畜造成危害郾J。随着人们对农药 基乙酸标记物，为进一步优化CL认检测含有 残留与环境风险的日益关注，急需更加科学、 二乙氧基的一类有机磷农药奠定了基础。 快捷和高效的检测手段，因此开发一种快速、 1材料与方法 简单、适于农药残留检测现场监控的痕量分析 方法具有重要的现实意义。化学发光免疫分析 1．1材料与仪器 技术(CUA)是一种特异性强、灵敏度高的 1．1．1试验材料 分析技术，广泛应用于生物工程、医学临床检 毒死蜱原药(98％)购于武汉泰鑫生物科 测中，但用于农兽药的研究国内外比较少。 技有限公司；碳酸钠，碳酸氢钠，乙腈，二氯 磁性复合微粒是20世纪70年代末发展起 甲烷，正己烷，无水乙醇，四氢呋喃，吐温 来并被广泛用于生物医学领域的超顺磁性纳微 20，氢氧化钠，30％过氧化氢均为分析纯，购 米复合粒子，磁性微粒具有磁响应性，成本 于国药集团化学试剂有限公司；3．巯基丙酸， 低、能耗少、无污染等特点，人们在磁性微粒 1．乙基．(3．二甲基氨丙基)碳化二亚胺盐酸盐 表面或通过磁性微粒表面的功能基团(如氨 (EDC·HCI)，戊二醛，鲁米诺均购于Sigma 基、羧基、巯基、环氧乙烷等)将酶、抗体、 公司；PBS缓冲液pH7．4：xM《蹦氨基末端 寡核苷酸等生物活性物质进行固定，可进一步 磁性微粒购于西安金磁纳米生物技术有限公 司；lcm光程的微量比色皿 基金项目：国家自然科学基金；湖北省 1．1．2实验仪器 研究与开发计划项目(2010BBB022)：中央高校基本 l江．5301PC型分光光度计(岛津仪器公 科研业务费专项资金(20llPY094)；华中农业大学国 家大学生创新性实验计划项目(101050428)。 司)；UV-1700紫外可见光分光光度计(岛津 作者简介；付彦(1989．)，女，在读本科。食品质量 仪器公司)；PhS-3C型数字pH计(上海雷磁 与安全专业。E-mil：fIl归nyin裔i器h印g@163．com 孟超，男，在读硕士，研究方向：食品安全。Bmail： 仪器厂)：旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器 superm姐gchao@163．coln。为共同第一作者。 厂)：DF．10IS型集热式恒温加热磁力搅拌器 通讯作者：刘晓宇，女，教授，博士，博士生导师。 研究方向：食品安全与农业资源综合利用。 (武汉