大黄灵仙颗粒剂对胆石症防治作用的基础研究.pdfVIP

2011年中医外科学术年会论文集 方中配伍柴胡、郁金、枳实、厚朴、白芍、丹参，旨在疏肝：配伍大黄、黄芩、赤芍、 金钱草、车前草、石苇，旨在利胆，全方疏肝与利胆协同作用，相辅相成。现代药理研究表 明郁金可促进肝脏分泌胆汁，松弛奥狄氏括约肌，增加胆汁排出，柴胡水煎剂可使犬总胆汁 排出量与胆盐成分增加，金钱草可促进胆汁从胆管排出，并有排石作用[2]。黄芩、大黄使 B2葡萄糖醛酸苷酶的活性下降，减少游离胆红素的生成，改善成石胆汁的理化性质，起到 预防胆石复发的作用；另外大黄有强烈的抑菌作用，能促进炎症脓液的消散和吸收[3]。张 西波等[4]研究发现，诸多清热利胆中药能明显降低胆汁中总胆红素、游离胆红素、总胆汁 酸、钙离子、细菌性和内源性B一葡萄糖醛酸酶活性的变化，增加胆汁中总胆汁酸含量，具 有很好的降低胆汁成石性的作用。 本组临床研究表明，疏肝利胆冲剂通过疏肝与利胆的作用，不仅能够更好更快地促进临 床症状和体征的恢复和肝脏功能的改善，减少成石性胆汁的分泌：而且能够调节胆汁成分， 减少成石性胆汁成分胆红素、钙离子和增加溶石性成分胆汁酸分泌；同时增加胆汁量的分泌， 有助于对泥沙结石的水流样冲洗作用。 大黄灵仙颗粒剂对胆石症防治作用的基础研究 唐乾利H，黄炜1，黄名威2，俞渊3，付军1，韩珊珊1 1．广西中医学院，广‘西南宁530001；2．广西医科大学附属肿瘤医院，广西南宁530021； 3．广西中医学院第一附属医院，广西南宁530023 现代医学认为肝细胞产生病理性胆汁是胆结石形成的基本要素u1。大量的临床资料表 明，胆结石的形成与肝脏的病变密切相关晗-3|，而胆结石的形成同样对肝脏产生损害，这种 相互作用的结果形成恶性循环可能是导致胆结石根治困难的原因之一H1。各种致石因素在肝 脏的综合表达中导致肝功能异常，胆汁成分代谢的改变直接导致致石性胆汁形成。治疗胆石 病不仅要清除胆石“异物”本身，更要恢复肝胆系统的正常生理功能，防止病理性胆汁的产 生。只有正本清源，才有可能防止胆结石的复发和再生，从根本上治愈胆石病¨’。虽然彻底 防止、逆转胆汁的成石性还很困难，但许多中药能作用于肝细胞基因水平，有望从病理性胆 汁形成这一中心环节找到治愈胆石病方法和途径。大黄灵仙复方颗粒是广西名中医唐乾利教 授多年临床实践总结的治疗肝胆结石疗效确切方剂。本研究旨在应用“胆病从肝论治”原则 来指导研究大黄灵仙颗粒保护实验家兔肝组织和调节肝组织胆固醇、胆汁酸代谢相关酶基因 表达的作用，以探讨其防治胆结石的作用机制。 —-299—- 2011年中医外科学术年会论文集 1材料与方法 1．1材料及主要实验设备 材料：新西兰大白兔由广西医科大学实验动物中心提供(许可证号：SCXK桂2009—0002)； 大黄灵仙颗粒由广西中医学院第一附属医院中心药房提供(医院内制剂，桂药监注[2002]175 BASIC 号)。组织总RNA抽提试剂盒、柱式回收试剂盒购自BIOINC公司；逆转录试剂盒， 荧光定量PCR Mix购自TAKARA大连宝生物工程有限公司。其他试剂均购自上海生工生物：L 程技术服务有限公司。 浆机(高速分散机)GF—l、荧光定量PCR仪(美国MJresearch公司型号：PTC2200)。 1．2方法 灵仙治疗组15只、正常对照组15只、大黄灵仙药物组15只。模型组和治疗组参照文献方 法H1制作慢性肝损伤模型(2周)，随后治疗组、药物组予大黄灵仙颗粒(制作成悬液)按参 考剂量m1灌胃1次／日，模型组和正常对照组以等体积生理盐水灌胃1次／日，两对照组。各 组给予常规饲料喂养，期间适量补充青饲料。造模及治疗时间总共5周。 1．2．2标本采集方法饲养过程观察记录不同时期各组动物的营养及体重情况，每周1次： 采集标本前禁饮食12h。剖杀前从兔耳缘静脉抽血，提取血清标本。剖杀方法：以水合氯醛 腹腔注射麻醉后剖腹用，碘伏毒皮肤后，打开腹腔，首先切取肝组织标，迅速切取芝麻大小的 肝组织投入装有预冷的2％戊二醛的小瓶中送电镜室制作透射切片、常规病理观察切片：而 后每只动物在相同部位切取约50mg的新鲜肝组织提取总RNA，同时适量备份肝组织液氮保 存。其后剖开胆囊，观察胆汁变化及成石情况等。 1．2．3兔肝组织病理及超