猪断奶后多系统衰竭综合征诊断方法的系列的探究.pdfVIP

}l国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集 猪断奶后多系统衰竭综合征诊断方法的系列研究 2 2 崔尚金。’。，全艳平1 3，李曦12，蔡阳14，符芳‘2，胡守萍。，付德霞1，吴东来’，曲连东 cireovirus 猪断乳后多系统衰竭综合征(PMWS)是一种由猪圆环病毒2型(porcine 性消瘦、呼吸困难、皮肤苍白、黄疽、腹泻和体表淋巴结肿大。多种组织发生广泛的肉芽肿性炎症，肉 芽肿性淋巴结炎、问质性肺炎、肝炎、问质性肾炎和胰腺炎。病理组织学变化主要是淋巴细胞组织不同 程度的衰竭萎缩，淋巴细胞减少。PMWS严重影响猪的生长发育，但对其发病机理，传染源等问题还不 完全清楚，本病没有有效的治疗方法，抗生素对PMWS患猪无效。但抗生素的使用和良好的饲养管理， 有助于控制二重感染。目前还没有疫苗可供应用。2000年众多猪场求助本实验室对一种新的猪病进行诊 的诊断方法进行了系列研究，这些方法适用于猪断奶后多系统衰竭综合征的诊断，现将这些研究和方法 汇报如下： 1、临床症状和病理变化 1．1 临床症状：根据以下主要临床症状可作出初步临床诊断：最常见的、也是确诊PMWS所必需的临 床症状是衰竭和生长发育不良，进行性消瘦；其它症状如精神不振、食欲不佳、被毛粗乱，消化不良、 肌肉衰弱无力、腹泻、皮肤苍白、黄疸，还有咳嗽、喷嚏、呼吸困难等呼吸系统症状。体表淋巴结，特 别是腹股沟淋巴结肿大。其它不常见的症状有发热、嗜睡、胃溃疡、中枢神经紊乱、猝死。这些临床症 状不会同时在同一头猪上出现。发病猪场在一段时间内会出现大多数症状。一些临床症状由于继发感染 或双重感染而恶化。 1．2 病理变化 1．2．1剖检变化：最显著的病变是全身淋巴结，特别是腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、气管、支气管淋 切面硬度增大，均匀的苍白色，集合淋巴小结也肿大。发生细菌感染，则淋巴结可见炎症和化脓病变， 使病变复杂化。肺肿胀不崩陷，有散在，大而隆起橡皮状硬块。严重的病例，肺泡出血，部分病例尖叶 和心叶萎缩或固质化。脾中度肿大，呈肉变。半数病例肝脏无明显异常，其它病猪表现不同程度的虎斑 状外观，并伴有轻度或中度萎缩，有的病例肝肿大。肾脏水肿，苍白，被膜下有自色坏死灶，盲肠和结 胃溃疡发生是多原因的。支气管肺炎与细菌感染有关，然而胃内病灶引起内出血，导致部分PMWS猪 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20问年庆典慨第十次学术研讨会论文集 死亡的原因，也是导致皮肤苍白的原因。 1．2．2组织学变化：淋巴结的皮质及副皮质区显著扩张，有单核／巨噬细胞，组织细胞浸润，有时还散 布着大量的多核巨细胞。淋巴细胞减少，淋巴结基质常增生或有嗜酸性细胞浸润。淋巴滤泡有由组织细 胞、类上皮细胞、巨噬细胞、多核巨细胞、嗜酸性自细胞、淋巴细胞集聚形成的肉芽肿。其它组织有广 泛的淋巴细胞、单核细胞、组织细胞浸润。 2、病毒的分离与鉴定 2．1材料准备 2．I．1器材：细胞培养瓶、盖玻片、圆形有盖平皿、微量移液器、恒温水浴箱、二氧化碳恒温箱、普通 冰箱及低温冰箱、离心机及离心管、组织研磨器、微孔滤膜、普通光学显微镜。 2．I．2试剂：RPMll640营养液、犊牛血清、青霉素(10籼g／mL)与链毒素(105g／mL)溶液、氯 仿、氨基葡萄糖、Hanks平衡盐溶液。 由美国伊阿华州立大学Kyoon—JinYoon博士惠赠，其他毒株为本实验室分离鉴定保存。 2．1．4样品：样品的采取和送检：在发病早期，无菌采取病猪的血清。对病死猪立即采取肺、扁桃体、 淋巴结、脾、肾、肝等组织数小块，置冰瓶内立即送检。不能立即检查者，应放一25℃～一30(2冰箱中， 或加50％甘油生理盐水，4℃保存送检。 样品的处理：若样品经PCR检测为PCV阳性，按如下方法进行处理。血清可直接使用。肺、淋巴 青霉素，两性霉素132009 l氯 仿，室温下不断混合10min，10009离心i0min。怀疑有细菌污染的样品，也可用0．年m微孔滤膜 过滤处理。取上清，注意避免吸出氯仿，分装，一70。C保存。 2．2操作方法 样品接种：取2ml上清液加到18