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电针对肾虚型复合应激模型大鼠胸腺形态学影响的研究 马彦红1盂宏2辛随成3图娅3 (1解放军305医院，2中国中医科学院，3北京中医药大学针灸学院) 慢性疲劳综合征(ChronicFatigue 年正式命名；CFS在各国均有发病，近年来其患病率、危害性正在逐年增加，给社会和人群 造成巨大的经济损失。 胸腺是重要的中枢淋巴器官，对机体免疫的发生与形成具有决定性作用，CFS与免疫功 能的相关研究已有不少报道，但是有关机体免疫器官形态学的改变则报道甚少，本实验观察 了电针对肾虚型复合应激模型大鼠胸腺光镜结构的变化，以期为CFS与免疫系统相关性提供 形态学依据。 1．材料 1．1实验动物 二级Wistar雄性大鼠。体重160-1809，由北京维通利华实验动物中心提供。 1．2试剂与仪器 1．2．1试剂：10％福尔马林 1．2．2仪器：SAKURA 系统 2．方法 2．1动物分组 周后，随机分为正常组、肾虚模型组、肾虚电针治疗组，每组16只．模型组与电针组动物 造模，电针组在造模同时进行治疗。 2．2模型制备 从第8天起，每笼饲养8只，除正常组外，其它各组动物开始接受肾上腺皮质激素应用 一停药法…加冷水游泳：肌肉注射氢化考的松20mg／kgbw，连续注射9天停药，同时每天在 水温21℃左右水中游泳30min，共21天，电针组治疗2l天。 2．3治疗方法 电针组于适应性饲养第8天，造模开始，参照《实验针灸学》(全国协编教材)大鼠穴位 定位．取“百会”、。足三里”和“太溪”(左右两侧交替使用，每次取单侧)。以华佗牌30 度。每次留针30分钟，每日1次，连续治疗21天。 2．4取材方法 大鼠快速断头取血，打开胸腔、腹腔，在冰上迅速分离出胸腺，称重后置Eppendorf管 99 中，保存于-70℃的冰箱中。 2．5测定和观察指标 2．5．1胸腺指数的测定 胸腺指数=胸腺重量(g)／／*重(g)×％ 2．5．2病理学检查：每个胸腺经1096福尔马林固定，SAKuRAVlP5Jr脱水机20小时脱水 浸蜡，包埋后选择最大切面切片、常规HE染色，光镜下观察一般形态学状况，并用Olympus 光镜及北航MIAS医学图像分析管理系统进行图像摄片。 2．5．3胸腺皮质厚度的测定：各切片均于lOX镜下拍摄尽可能多的，含有完整皮质和 髓质区域的图像，输入北航MIAS医学图像分析管理系统，在各图像中沿皮质画线，测量皮 质厚度，根据每张图像中胸腺皮质的平均厚度计算每张切片中胸腺皮质平均厚度。 2．6统计处理 实验数据用SPSSIO．0软件进行分析，以平均值土标准差(x士S)表示，组间差异采用 方差分析(ANovA)，以PO．05作为显著性差异的标准。 3．结果 3．1胸腺指数的测定结果： 表l电针对肾虚型复合应激大鼠胸腺指数的影响(叉±SD) 注：木与模型组比P0．05 从表l可以看出模型组与正常组、电针组比较体重增长缓慢，差异显著PO．05，但三 组间胸腺指数比较无显著性差异。 3．2．三组动物胸腺形态学改变比较： 3．2．1光镜结构比较： 3．2．1．1正常组：胸腺被膜完整，小叶结构清晰，包膜完整，皮髓质分界清楚，皮髓质 厚度比例约为2～3：1，皮质部成熟的染色较深的淋巴细胞密集，核呈兰紫色，胞浆为粉红 色。髓质部染色较浅的上皮网状细胞较多，呈星形，多突起，细胞核较大，胞浆丰富；髓质 结构比皮质疏松，未见胸腺小体。(见图卜图4) 3．2．1．2肾虚模型组：胸腺的基本结构紊乱，皮质与髓质厚度比例约为1：l～2，皮质 变薄，淋巴细胞数明显减少，细胞松散，核染色质致密浓缩，核固缩，染色深。皮髓质内细 胞数均减少。(见图5一图8) 3．2．1．3肾虚电针组：胸腺被膜较完整，小叶结构存在，皮质和髓质厚度比例约为1-2： l，皮质部成熟淋巴细胞数较正常组略少，较模型组多，核染色质致密浓缩，核固缩。(见图 9一图12) 3．3三组动物胸腺皮质厚度测定结果比较： 100