还脑益聪方对认知功能障碍大鼠海马bcl-2、bax蛋白表达与影响.pdfVIP

世界中西医结合杂志， 2007，12(2)：692—694． 6戴淑芳，高溪，徐红．益智冲剂对小鼠学习记忆障碍的改善作用【J】．大连医科大学学报， 2002，24(1)：22～24． factorsforvasculardementiain 7 a1．Risk Stella，F，Banzato，C．E，Gasparetto，SeE，et functions．J with cognitive Neurol elderlypsychiatricoutpatientspreserved 还脑益聪方对认知功能障碍大鼠海马bcl-2、bax 蛋白表达的影响 李浩姚明江徐立刘剑刚赵文明 中国中医科学院西苑医院北京100091 摘要目的：观察复合因素所致认知功能障碍大鼠海马区细胞凋亡情况及还脑益聪方的干预作 用。方法：采用皮下注射D—半乳糖及饲喂半高脂饲料的造模方法，建立认知功能障碍动物模型，采 用原位TUNEL染色、免疫组化法检测海马区细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白bcl一2、bax的变化，并 用还脑益聪方进行治疗。结果：高j低剂量的还脑益聪方可减少海马细胞凋亡数量(P0．01)；高、 抑制bax表达，加速细胞修复，保护损伤脑组织，改善认知功能障碍大鼠学习记忆能力。 关键词认知功能障碍；细胞凋亡；海马；还脑益聪方 认知功能障碍(又为认知功能衰退、认知功能缺损或认知残疾)泛指由各种原因(从生理性老 化到意识障碍)导致的不同程度的认知功能损害的临床综合征，重者如各种类型痴呆，轻者如轻度 认知功能障碍等【l】。随着我国逐渐进入老龄化社会，认知功能障碍的人口正逐年增加，许多中老年 人及其家人正在经受认知功能障碍所带来的痛苦，同时也为整个社会带来巨大的经济负担【z】。神经 细胞的凋亡在神经退行性疾病中起着主导性作用，凋亡过程的诱导因素如AB，氧化损伤，低能量代 谢均存在于认知功能障碍脑组织中(3】。海马组织直接参与信息的储存和回忆，是认知功能障碍研究 领域中涉及最多的脑区之一。本实验以D—半乳糖联合半高脂饲料致认知功能障碍大鼠为模型，观察 其海马细胞凋亡情况并探讨还脑益聪方的作用机制，以期指导临床。 1材料与方法 1．1主要试剂 POD凋亡检测试剂盒(石蜡)由天津灏洋生物制品科技有限公司提供；bcl．2、bax免疫组化试 方：5％猪油+0．5％胆固醇+5％蛋黄粉+89．5％基础饲料)由北京科澳协力饲料有限公司提供；还脑益 聪方水煎剂(组成：何首乌，人参，石菖蒲，黄连，葫芦巴，川芎等)由中国中医科学院西苑医院 3】l 1．2动物模型制备 采用D半乳糖联合半高脂饲料造模，该模型前期研究已证实存在记忆障碍，接近认知功能障碍 5组，即中药高剂量组、中药低剂量组、阳性药对照组、模型对照组、空白对照组，每组6只。中 周开始同时给予半高脂饲料饲喂。第7周开始给予还脑益聪方混悬液lmYl009体重灌胃(用药量为 El 1次，至第10周末。中药低剂量组(简称中低组)：每日于颈背部皮下注 生药149．蚝以体重)，l 射D斗乳糖50mg．kg。1体重，共10周，并于第5周开始同时给予半高脂饲料饲喂。第7周开始给予 开始同时给予半高脂饲料饲喂。第7周开始给予盐酸多奈哌齐混悬液lml／1009体重灌胃(用药量为 半乳糖50mg．kgd体重，共10周，并于第5周开始同时给予半高脂饲料饲喂，至第lo周末。空白对 照组(简称空白组)：每日于颈背部皮下注射等量生理盐水，共lO周，并饲喂普通饲料，至第10周 末。 1．3指标的测定 1．3．1标本选取与制备 实验结束后第2d，用100k水合氯醛腹腔麻醉后剖开腹腔及胸腔，暴露心脏，剪开右心耳，经升 配制，PH=7．4)进行灌注固定1小时，直到动物全身呈僵直状态，灌流结束后，断头取全脑，常规 脱水、透明、浸蜡、包埋，选取海马部位，将