100株深海真菌次生代谢产物的生物活性初步研究.pdfVIP

第29卷第4期 台口 湾，弓Ⅱ可1瓠海 峡 V01．29，No．4 2010年11月 OF0CEANOGRAPHYINTAIWANSTRAIT Nov．．2010 JOURNAL 100株深海真菌次生代谢产物的生物活性初步研究 徐新霞，易志伟，马 群，盖英宝，汤熙翔 (国家海洋局第三海洋研究所，福建厦门361005) 摘要：利用中国“大洋一号”第20航次采集的深海沉积物样品进行了真茵分离鉴定，获得110株深 海真菌，这些茵分属于15个属．其中曲霉和青霉最多，共为55株，占50％，且重复较多，只分布于 10个种．利用CCK8法及琼脂扩散法对其中的100株深海真菌进行了抗肿瘤及抗茵活性检测，发现 深海真菌具有良好的生物活性，细胞毒阳性率占49％，26％的菌株具有明显抗大肠杆菌效果、23％ 明显抗枯草、5％抗白假丝酵母、21％抗金黄色葡萄球菌．生物活性与培养基成分及筛选用肿瘤细胞 株类型相关．对具有生物活性的20株深海真菌发酵粗提物进行了HPLC指纹图谱初步分析，发现 其HPLC指纹图谱与培养基成分相关．该研究为后期分离鉴定深海真茵产生的生物活性化合物奠 定了良好基础． 关键词：海洋生物学；深海；真菌；生物活性；HPLC指纹图谱 DOI：10．3969／J．ISSN．1000．8160．2010．04．005 中图分类号：Q93 文献标识码：A 000 海洋覆盖了地球面积的70％以上，其中深海(一般指水深l m以下的海洋)环境占地球表面积的 49％，是地球表面最大的生物柄息场所，被认为是目前地球上物种资源最丰富的地区．深海微生物¨。1处于 高压、低温(部分区域如热液ISl为高温)、厌氧、极端pH值梯度、高盐含量、高金属含量、无光照、寡营养、高卤 素等特殊极端环境中，由于其生态环境的特殊性，决定了深海微生物具有一些特异的代谢途径和遗传背景， 导致深海微生物次生代谢产物具有化学结构奇特、新颖，生物活性多样等特点H。7J．特殊结构天然产物，对于 增强药物的特异性和有效性、减少毒副作用和防止耐药性等均至关重要，对发现药物先导化合物、研究药物 作用新靶点、新机理等具有重要科学意义． 海洋真菌是一类具有真核结构，能形成孢子，营腐生或寄生生活的海洋生物，包括来源于海洋的专性海 洋真菌与来源于陆地或淡水，能在海洋生境中生长与繁殖的兼性海洋真菌． 到2006年为止，从海洋真菌次生代谢产物中共发现新天然产物500多种¨。9】，其中一些具有良好的抗菌、 抗肿瘤、抗病毒等生物活性．这些真菌大多数来源于海绵(28％)和海藻(27％)，来自海洋沉积物的较少(4％)． 本文利用中国“大洋一号”第20航次采集的深海沉积物样品进行了深海真菌的分离鉴定及其次生代谢产 物生物活性的初步研究． 1材料和方法 1．1 样品来源、试剂及设备 本文所用深海沉积物样品为中国“大洋一号”第20航次采集，共27个样品，采样后一直置于4。C保存． 真菌发酵用培养基为半人工海水PDA培养基(各组分含量：土豆粉20g／din3、葡萄糖20g／din3、人工海水 500 cm3／dm3)和半人工海水GYP培养基(各组分含量：葡萄糖10g／dm3、蛋白胨29／din3、酵母膏0．5S／dm3、 人工海水500cm3／dm’)．真菌ITS扩增引物序列：rrs4 5’一GGAAG- TAAAAGTCGTAACAAG 收稿日期：2009．11．1l 基金项目：福建省科技计划重点资助项目(2009N0040)；国际海底区域研究开发“十一五”资助项目(DYXM·115-02-2-9) 作者简介：徐新霞(1984一)。女，硕士生；E-mail：xuxinxia52535@yahoo．tom．cn 通讯作者：汤熙翔(1974～)。男，副研究员；E-mail：t∞鲥xi∞g@hommil．con 万方数据 4期 徐新霞等：100株深海真菌次生代谢产物的生物活性初步研究 ‘467· 海爱朗仪器有限公司产品，Model6