固定丝素蛋白膜中的联吡啶钌电化学发光行为的研究与应用_临床医学论文.docVIP

固定丝素蛋白膜中的联吡啶钌电化学发光行为的研究与应用_临床医学论文 固定丝素蛋白膜中的联吡啶钌电化学发光行为的研究与应用_临床医学论文 作者：李利军 蔡卓 蓝苏梅 吴启涛 程龙军 郝学超 【摘要】 　　基于苯海拉明对联吡啶钌(Ru(bpy)2+3)的电化学发光的增敏作用和丝素蛋白联吡啶钌复合膜修饰玻碳电极稳定好的特点，建立了一种以丝素蛋白多孔膜联吡啶钌复合物修饰的玻碳电极电化学发光检测苯海拉明的新方法。结果表明，该修饰电极具有很好的电化学活性和电化学发光(ECL)响应。在最佳实验条件下，苯海拉明浓度在1.0×10－4～1.0×10－7 mol/L范围内与其相对发光强度呈良好的线性关系(r=0.9989)； 检出限为2.3×10－7 mol/L（S/N=3）。连续平行测定3.78×10－5 mol/L苯海拉明5次，发光强度的RSD为1.76%。 用于实际样品中苯海拉明的测定，结果满意。 【关键词】 苯海拉明；电致化学发光； 联吡啶钌；丝素蛋白；化学修饰电极 　　Abstract Based on the increasing effect of diphenhydramine on Ru(bpy)32+ electrochemiluminescence (ECL) system, an ECL method was developed for the determination of diphenhydramine hydrochloride by silk fibroin (SF)３ composite film modified glassy３ composite film modified glass9989) in the concentration of diphenhydramine hydrochloride of 1.0×10－4－1.0×10－7 mol/L and the detection limit (S/N=3) was 2.3×10－7 mol/L. The RSD for 5 times determination of 3.78×10－5 mol/L diphenhydramine was 1.76%. Keywords Diphenhydramine; Electrochemiluminescence; Tris(2,2′bipyridine)ruthenium; Silk fibroin; Modified electrode 　　1 引 言 盐酸苯海拉明(Diphenhydramine hydmchloride，DPH)化学名为N,N二甲基二苯基甲氧基)乙胺盐酸盐，又名苯那君，是一种氨基醚类衍生物，为常用的抗组胺药物。具有抗过敏、止痒、消炎、消肿、镇静及镇吐等作用，临床主要用于荨麻疹、枯草热、过敏性鼻炎和皮肤瘙痒等皮肤黏膜变态性疾病。目前，对DPH的测定方法主要有原子吸收法[1]、疏水作用电动色谱法[2]、分光光度法[3]、离子选择电极法[4]、流动注射分光光度法[5]﹑气相色谱法[6,7]及电化学法[4]等，分别用于片剂[1,3,4,7]、药膏[2]、胶囊[5]和糖浆[5,7]中DPH的测定。虽然这些方法均可直接或间接测定1×10－5～1×10－3 g/L的DPH，但仍不能完全满足临床痕量分析的要求。而且这些方法多存在操作繁琐或设备昂贵、费时等缺点。中国药典2005版采用容量法测定苯海拉明[8]，此方法操作繁琐，终点不易观察，且仅适用于常量分析。因此，开发简便灵敏测定DPH的方法具有重要意义。 　　丝素蛋白(Silk fibroin，SF)是从蚕丝中提取的一种优良的天然高分子材料, SF具有无毒性、无刺激性、无过敏性和良好的生物相容性[9,10]，再生SF已被用于伤口保护、细胞培养、生化酶固定、隐形眼镜镜片和药物释放器等方面[11]。用溶解丝素制备的丝素膜在现代科学领域中具有广泛的应用，如人工皮肤材料、药物控制释放载体、固定酶载体、生物传感器等[12～14]。实验证实，SF可以对多种细胞表现较好的粘附和增殖，具有良好的细胞相容性，并可以通过共混、接枝、交联等方式提高或改变SF的理化性能[15,16] 。 联吡啶钌是目前应用范围最广和研究最活跃的电化学发光体系［１７，18］。本实验是以SF作为模板,利用SF与Ru(bpy)2+3相互作用，反应形成新的物质或相互吸附得到的混合物膜，从而制备了新型传感器，实现了Ru(bpy)2+3的固定。实验结果表明，此修饰电极对联吡啶钌具有很好的电化学和电化学发光特性。 目前，关于用电化学发光测定DPH的报道较少。以SF固定联吡啶钌构建电化学发光传感器尚未见报道。本研究用SF膜固定联吡啶钌修饰玻碳电极，建立了测定DPH的电化学发光新方法, 实现