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多波长UVR相干作用对视网膜光感受器损伤特点及损伤后的恢复_临床医学论文 多波长UVR相干作用对视网膜光感受器损伤特点及损伤后的恢复_临床医学论文 作者：李亚萍 李光宇 刘早霞 苏冠方 孙大军 【摘要】 目的 研究不同波段UVR相干作用对视杆细胞损伤的特点。方法 6 w龄albino Sprague大鼠随机分成4组，每组20只。UVR辐射光来自于与单色器相连的高压银汞灯，最大的输出能量在300 nm (UVR和 310 nm (UVR。每只动物暴露1只眼，2组只暴露于UVR剂量: 8 kJ/m2,时间为70 min;另2组先暴露于UVR剂量4 kJ/m2,时间35 min;然后同一只眼再暴露于UVR剂量42 kJ/m2,时间35 min。于暴露后第3、8天，处死动物。分别行光镜和电镜检查。结果 与其他2组比较，UVR暴露后第8天部分视杆细胞丧失，但同时视杆细胞外节盘膜(ROS)却逐渐恢复（0.05）。UVR组暴露后第8天与第3天比较，ROS水肿明显减轻，ROS变短；内节盘膜长短和排列恢复；视网膜外核层染色质密度多数恢复，少数发生核固缩；RPE内空泡状吞噬小体已不见。结论 不同波段UVR相干作用后，视网膜视杆细胞可能存在恢复机制，但这种损伤修复过程相当缓慢。其机制可能是细胞适应性反应，也可能是慢性细胞损伤。 【关键词】 视网膜视杆细胞；UVR；相干作用；生物学效应 太阳光中300 nm左右UVR的生物学效应很强，Laube〔1〕报道其可以穿过透明晶体到达视网膜。随UVR辐射强度的增加，对人视网膜的损伤也逐渐加重。光损伤首先引起光感受器的改变，然后是视网膜色素上皮(RPE)的损害，但损伤视杆细胞还是视锥细胞取决于不同的物种，在大鼠主要损伤视杆细胞。视杆细胞光损伤开始于内、外节盘膜，如果损伤严重可导致视杆细胞死亡；如损伤轻微，通过损伤修复机制，其结构将恢复〔2〕。本研究旨在探讨视杆细胞外节盘膜(ROS)是否可从UVR的损伤中恢复。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物 　　所有shalbino Sprague雌性大鼠购自Mamp;B Denmark,保存在可调温动物室，每天12 h灯光照明（平均照明度5 lux），12 h黑暗；动物适应喂养直到6周龄用于实验。所有大鼠都按ARVO的眼、视光学研究条例进行饲养和实验操作。 　　1.1.2 UVR光源 　　辐射光来自于350 W的高压银汞灯，直射出的辐射线首先经过水冷却，然后经过两个单色器（λmax=300 nm with 10.1 nm full width at half maximum〔FWHM〕;λmax=310 nm with 13.5 nm FWHM）。最后辐射光照在角膜上。在角膜水平，辐射光被热电器(model 7101; Oriel,Stratford, CT)测量。热电器测量标准由美国国家计量局建立。 　　1.2 分组 　　80只6 w龄大鼠随机分成4组。其中2组的每只大鼠右眼活体暴露于UVR，剂量8 kJ/m2 ，时间70 min；一组在暴露后3 d被处死，另一组在暴露后8 d被处死。另2组中的每只大鼠右眼活体暴露于UVR，剂量4 kJ/m2，时间35 min；然后同一只眼再暴露于UVR，剂量42 kJ/m2，时间35 min；一组在暴露后3 d被处死，另一组在暴露后8 d被处死。每一只大鼠左眼没有光暴露。 　　1.3 方法 　　每只大鼠为以95 mg/kg ketamine和14 mg/kg xylazine混合腹腔注射麻醉5 min后，1%散瞳剂tropicamide 1滴滴双眼。5 min后，固定动物右眼上下眼睑，右眼暴露于UVR。分别于光暴露后第3、8天以过量的CO2处死大鼠，剜出双眼，去除眼球前节组织和玻璃体，以视盘为中轴纵形垂直剖开眼球，再以视盘为中心水平将颞侧半眼球剖开成2份（各1/4眼球大小），一份置于10%中性福尔马林溶液中，另一份置于3%戊二醛溶液中固定。分别行光镜和电镜检查。 　　1.4 光镜和电镜检查 　　光镜观察的标本用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜进行观察。电镜观察的标用1%四氧化锇后固定，切片，双氧铀醋酸铅柠檬酸盐环氧染色后，用JEM电镜进行观察。 　　1.5 统计学方法 　　采用SAS软件，数据处理采用秩和检验。 2 结 果 　　2.1 组织形态学变化 　　UVR暴露后3 d组，颞侧ROS与非暴露眼无明显差别（图1A、1B）。UVR暴露后3 d组，颞侧ROS明显水肿，外节盘膜间的空隙增大；内节盘膜略短，并有空泡形成；视网膜外核层（ONL）染色质密度增浓（核固缩早期）；RPE内见空泡状吞噬小体形成（图1C）。UVR暴露后8 d组，颞侧ROS与非暴露眼无明显差别。UVR暴露后8 d组，颞