大鼠股骨骨不连模型不同位点骨形态发生蛋白2基因的表达_临床医学论文.docVIP

大鼠股骨骨不连模型不同位点骨形态发生蛋白2基因的表达_临床医学论文 大鼠股骨骨不连模型不同位点骨形态发生蛋白2基因的表达_临床医学论文 作者：李阳, 钱栋, 马鹏, 刘小平, 崔学文, 徐晓峰 【摘要】 目的： 观察大鼠股骨骨不连模型修复过程中骨形态发生蛋白在各个时间段的表达情况,初步探讨单一生长因子对骨不连修复的影响。方法： SD大鼠分别于取材前35天、28天、21天、14天、7天、3天和1天建造股骨骨不连模型,同一天处死大鼠取材,RT技术检测各个样本的BMP基因的表达情况。结果： 在大鼠股骨骨不连修复过程的不同时间,BMP基因表达在中心区和外周区存在差异,中心区BMP基因表达滞后,表达的增幅及峰值低于边缘区。结论： 大鼠股骨骨不连中心区在修复早期BMP基因的低表达及表达时间滞后可能是其骨不连发生的原因之一。 【关键词】 骨不连; 骨形态发生蛋白2; 大鼠 　　[Abstract] Objective: To observe the genic dynamic expression of bone morphogenetic proteinrestoration of rat femoral nonunion and to discuss its influence to the restoration of rat femoral nonunion. Methods： The models of femoral nonunion of SD rats were established in day 1,3,7,14,21,28,35 before we extracted the specimens, and then the genic expression of BMP2 in different repairing stage of nonunion models were detected by RTPCT technique. Results： In different stages of femoral nonunion, the genic expression of BMPnt and the peak level were significantly lower in the central zone than those in the outer zone,and we can find the lag in the genic expression of BMP2 in the central zone. Conclusion： Lower value and the lag in genic expression of BMPne during the early stage may be an important reason of nonunion occurring in rat femur. 　　[Key words] nonunion; bone morphogenetic protein 　　导致骨缺损、骨不连的原因仍不完全明了。在缺损区域促进骨形成是骨不连治疗的重要理念,在能够促使骨形成的因素中,最引人注目的是细胞因子的诱导和促进作用,其中成骨作用最为突出的是骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein。BMP是最主要的调节骨形成的信号蛋白,BMP基因的表达在骨的发生、诱导、修复和骨量保持方面发挥着重要而关键的作用,其表达水平的高低直接影响间充质骨细胞分化和骨量产生水平,而BMP基因在骨不连中表达的相关报道较少。本实验通过建立大鼠股骨骨不连模型探讨骨不连修复过程中BMP基因表达在时相和位相上差异,以初步了解BMP基因在骨不连修复过程中的表达情况,探讨BMP对骨不连修复可能产生的影响。 　　1 材料和方法 　　1.1 动物、试剂及仪器 　　健康SD大鼠35只,雌雄不限,体质量约350g,由江苏大学动物实验中心提供,动物使用许可证:SCXK(苏)2002于本院中心实验室动物房饲养,光照昼夜交替,房间温度20～26 ℃,湿度低于80%。异丙醇、无水乙醇、氯丙醇(国药集团化学试剂有限公司),Trizol(Invitrogen公司),DEPC水(上海生工生物工程有限公司),逆转录及RT试剂盒(TaKaRa公司),高速离心机(Eppendolf centrifuge 5804德国),紫外分光光度计(Eppendolf Biophotometer,德国),RT仪器(MX3000P real time PCR，美国Stratagene公司)。 　　1.2 方 法 　　1.2.1 动物模型的制作 精选体质量、年龄都相当的大鼠,称重后0.2%(0.2 ml/100 g)盐