大鼠脑梗死模型中载脂蛋白J mRNA表达的研究_临床医学论文.docVIP

大鼠脑梗死模型中载脂蛋白J mRNA表达的研究_临床医学论文 大鼠脑梗死模型中载脂蛋白J mRNA表达的研究_临床医学论文 【摘要】 目的 探讨载脂蛋白J (ApoJ ) 在大鼠脑梗死急性期的作用及其机制。方法 清洁级SD雄性成年大鼠70只,随机分为正常对照组、假手术组、脑梗死后6 h组、24 h组、3 d组、5 d组和7 d组。用线栓法制备永久性局灶性脑梗死模型,动物处死后检测ApoJ及补体C3mRNA的表达值。结果 各模型组手术侧ApoJ mRNA表达和C3mRNA表达水平均高于正常对照组及假手术组(0.01),C3的表达从脑缺血后6 h起高于对照组,而ApoJ在缺血后24 h才出现表达增强。ApoJ mRNA表达值与补体C3 mRNA表达水平呈正相关(r=0.427,0.01)。结论 大鼠脑梗死后补体C3激活,ApoJ的表达代偿性增高,以抑制补体的活性,从而抑制补体介导的神经元死亡,起神经元保护的作用。 【关键词】 载脂蛋白J;补体C3;脑梗死 　　Abstract：Objective To investigate the mechanism of the neuroprotective effect of ApoJ in rat acute cerbral infarction.Methods 70 healthy male SD rats were divided randomly into normal control group,shamoperated group, cerebral infarction 6 hour group, 24 hour group, 3 day group, 5 day group and 7 day group. Permanent cerebral infarction models were prepared by occluding the middle cerebral artery (MCA) using thread embolizing，the C3 and ApoJ mRNA expression was analyzed by RT-PCR.Results An increased expression was found in ischemia rat brain and a low level expression ApoJ mRNA was detected in normal rat brain, a positive correlation found between C3 mRNA and ApoJ mRNA expression (r = 0.427，0.01).Conclusions Increased ApoJ expression may be invoved in neuroprotection in cerebral infarction by inhibiting the complement activation. 　　Key words： ApoJ; complement component C3; cerebral infarction 　　载脂蛋白J(Apolipoprotein J,ApoJ)是Desilva 等人从血清中分离提纯出一种新的酸性糖蛋白，可与脂质结合成脂蛋白，存在于血浆中[1]。ApoJ在人体不同组织和体液中广泛存在,在脑中浓度最高;有研究表明ApoJ具有结合和转运脂质、抑制补体活化及保护细胞膜等功能[2]。ApoJ在许多病理过程中有所表达, 许多神经系统疾病ApoJ的表达均显著增高。本文拟对大鼠脑梗死模型脑内的ApoJ表达及可能的作用机制进行研究。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物及分组 　　清洁级雄性SD大鼠70只,体重60～120 g ,鼠龄3～4 个月,随机分为正常对照组、假手术组、脑梗死后6 h组、24 h组、3 d组、5 d组、7 d组,每组10 只。 　　1.2 检测指标 　　用RT-PCR方法检测ApoJmRNA及补体C3mRNA表达值,以补体C3mRNA表达值作为补体激活的评价指标。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 脑梗死模型制备 　　用线栓法制备永久性脑梗死模型,出现局灶性神经功能缺损者为模型制备成功,无神经功能缺损但经TTC 染色(盐酸2，3，52三苯基四氮唑) 证实脑组织内有梗死灶存在者仍视为模型制备成功。 　　1.3.2 半定量RT-PCR法检测ApoJ mRNA及C3mRNA表达 　　分别取双侧脑组织匀浆,用一步法总RNA 提取试剂盒提取总RNA;用逆转录试剂盒以总RNA为模板合成CDNA;将cDNA在PTC220型PCR 热循环仪上进行扩增:ApoJ引物序列为TACA