子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究_临床医学论文.docVIP

子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究_临床医学论文 子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究_临床医学论文 【摘要】 目的 研究子宫腺肌病中孕激素受体亚型的表达，探讨孕激素受体亚型(hPR)在子宫腺肌病发病中的作用机制。方法 运用免疫蛋白印迹法(Western blot)和RT-PCR方法测定子宫腺肌病患者（24例）病灶及其在位内膜及对照组（19例）子宫内膜标本中孕激素受体亚型在蛋白和mRNA水平的表达，计算机图像分析、半定量研究孕激素受体亚型的表达。结果 子宫腺肌病异位内膜中hPRs的表达均明显低于在位内膜和对照组，研究组在位或异位内膜中，hPR-A含量均高于hPR-B；而在mRNA水平上则差异无统计学意义(Pgt;0．05)。结论 子宫腺肌病异位内膜hPRs蛋白的表达均明显低于在位内膜，而在mRNA水平上却无显著性差异；hPR蛋白的活性可能受转录后调节。 　　【关键词】子宫腺肌病；人孕激素受体亚型；免疫蛋白印迹法；反转录聚合酶链反应 　　 　　【Abstract】 Objective To study the expression and the mechanism of human progesterone receptor(hPR) isoforms in adenomyosis.Methods Western blot and RT-PCR were employed to investigate the expression of hPR isoforms in ectopic lesion from adenomyosis and normal endometrium from controls.Computer densitomitry was used to study the relative expression of the hPR isoforms at protein and mRNA levels.Results The expressions of hPR isoforms are lower inadenomyosis than in endometrium(0．05).The concentration of hPR-Awas higher than that of hPR-B in both adenomyosis and endometrium.(0．05).Conclusion The expressions of hPR isoforms are lower in adenomyosis than in endometrium.No significant differencewas found between the PR-mRNA in these two tissues.Our data suggest that PR activity can be regulated post-transcriptionally. 　　【Key words】Adenomyosis;Human progesterone receptor isoforms; Western blot; RT-PCR 　　 　　子宫腺肌病（adenomyosis）是指子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层并在其中生长所致，其明显的临床症状严重地影响生育年龄妇女的健康。虽然，它表现为一种性激素依赖性疾病，但是，具体的病因和发病机制目前尚未完全明确。研究发现，临床上该疾病孕激素治疗仍存在着疗效反应差的现象，而孕激素受体拮抗剂米非司酮对子宫腺肌病有一定的治疗作用[1]，推测可能由于孕激素受体亚型（hPR）存在着不同的转录活性及其组织特异性所致。本研究通过对子宫肌瘤中孕激素受体亚型的表达，探讨其在子宫腺肌病发病中的作用及可能的耐药机制。 　　1 资料和方法 　　1．1 一般资料 收集2006年2月至2007年10月在徐州医学院附属医院妇产科，因子宫腺肌病行全子宫切除术患者的标本24例作为研究组，平均（43．7±4．3）岁；另取同期住院因子宫肌瘤或宫颈病变行子宫切除 19例作为对照组，平均（44．3±5．4）岁。两组均为绝经前妇女，有临床症状但月经周期规律，术前至少6个月未接受性激素治疗，通过末次月经时间和术后子宫内膜病理证实为增殖期。两组患者在年龄上差异无统计学意义(Pgt;0．05)。 　　1．2 方法 　　1．2．1 标本处理 取研究组患者在位子宫内膜和异位病灶组织、对照组子宫内膜组织各0．5 g低温（-70℃）冻存。分别行组织蛋白及总RNA的提取。 　　1．2．2 主要试剂和引物 小鼠抗人孕激素受体单克隆抗体，北京市肿瘤所免疫室提供；生物素化羊抗小鼠Ig-G，华美生物公司；辣根酶标记链亲和素，中山生物公司；中分子量蛋白