MS-MLPA及MS-PCR方法诊断Prader-Willi综合征.pdfVIP

20ff年弧烹匿学会f1．_科学分会擘_7I}年会论文℃编 王薇1吴晓燕1宋红梅1邱正庆1孟岩2 施惠萍1赵时敏1黄尚志2姚凤霞3魏珉1 1北京协和医学院北京协和医院儿科100730 2北京协和医学院基础医学院遗传研究室100005 3北京协和医学院北京协和医院中心实验室 100730 基化的父源等位基因具备功能活性，而甲基化的母源等位基因没有活性。据国外报道，PWS患者 25％)，印记中心微缺失及突变(1％～5％)，以及少量的染色体平衡易位。目前已有PWS的临 床诊断标准，但对于很多疑似患者，仅根据临床症状很难确诊，需要进行分子生物学方法进行遗 传基因的分析。 目的 增)方法对PWS疑似患者进行基因分析，对疑似患者进行确诊以及遗传类型分型，并比较两种诊断 方法的差异。 Modification试剂盒进行亚硫酸盐修饰；以正常人为阴性对照，临床诊 组DNA用CpGenome聊Fast 断患者为阳性对照，未修饰的基因组DNA为系统对照，应用M(母源)、P(父源)两对引物同时 MLPA ME028试剂盒)：将基因组DNA与多重探针杂交过夜，进行连接反应(拷贝数检测)及酶 切后的连接反应(甲基化检测)，将两种产物分别进行PCR反应，将PCR产物分别进行片段分析。 应用GeneMarker V1．5软件，以正常人为对照，对结果进行分析。 结果 均仅显示M带，37例疑似患者中有12例仅显示M带证实为PWS患者，其余25例除外。2) 二体型PWS患者；25例疑似患者C值为1，M值为0．5被除外。 结论 可用于PWS患者的分型，19例患者中母源二体型为10．5％，父源缺失型89．5％。 ·136·