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·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·361·
克隆、剪切变体鉴定与功能初探
何夏萍’，孟风艳1，黄桂安1，聂庆华2，张细权2，王亚军p
510642)
(1．四川大学生命科学学院，四川成都610064；2．华南农业大学动物科学学院，广东广州
引育
血肠肽(Vasoactiveintestinal
舒张，并在中枢神经系统中有重要功能。垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide，
核苷酸序列在进化过程中高度保守，并广泛分布于大脑与边缘组织中。有研究证明PACAP在多种组织中可作为激
素、神经激素、神经递质和营养因子参与众多生理过程，包括生殖、生长发育、免疫应答等。
I型受体，VIP I型受体(VPACI)与
VIP与PACAP可经由其共有受体(VIPII型受体)发挥生理学效应。VIP
VIP
接变体，并拟侧重从生长和繁殖方向探讨VPACl和VPAC2在家猪中的重要生理功能。
材料与方法
能。R，r-PCR检测VPACl和VPAC2在家猪中的组织表达图谱。
结果
(D长白V／P基因eDNA全长l
077bp，编码167个氨基酸的前体蛋白，未成熟氨基酸序列在哺乳动物中高度保
守，约有85％以上的氨基酸残基相同；②长白猪y黝CJ基因eDNA全长1
471bp，由13个外显子和12个内含子组
成，编码458个氨基酸的前体蛋白。此外。我们还鉴定到该基因具9种不同剪接变体．其剪接主要发生在前7个外
显子；最长的剪接变体eDNA全长l
586bp，比正常形式多一个长115bp的新外显子，位于第一个外显子后；组织表
达图谱显示表达丰度最高的剪接变体大小为l107bp。(勤长白猪y黝c2基因eDNA全长l481bp，由13个外显子
高效激活。⑤在培养的HepG2细胞中，家猪y黝cJ的5’一端侧翼序列(1767bp)也具很强的启动子活性。
讨论与结论
究在长白猪脑组织中。发现至少存在9种不同的VPACI剪接变体，所有剪接变体都存在阅读框改变或翻译提前终
止。此外，本研究在长白猪中亦发现一个新的yPAc2剪接变体。其第6至第7个外显子间存在一个新的外显子
(exon
6a，106bp)，该外显子的存在导致翻译提前终止。基因表达存在时空差异性，但其最主要的调控仍在转录水平
上，针对剪接变体的研究有望获取该基因的作用机制。我们的研究结果显示家猪VPACI和VPAc2在基因结构及
组织表达图谱上异于人、小鼠等其它哺乳动物，暗示两受体在家猪中的发挥着独特的生理作用。
关键词：猪；血肠肽(vw)；垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)；V朋CI；VPAc2
致谢：本研究受国家转基因新品种培育重大专项(2009ZX08009-145B)支持。
+通讯作者，E—mail：cdwyjhk@gmail．corn。
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