LPS预处理对Mψ株产生细胞因子的致敏与耐受的研究.pdfVIP

18．LPS预处理对M9株产生细胞因子的致敏和耐受的研究 孙卫民1刘辉2徐仁宝2 r第二军医大学免疫学教研宣，2病理生理学教研室，上海200433) 目的：内毒素的主要毒性成分LPS预处理可诱导机体和巨噬细胞(MQ)产生LPS 耐受(或低反应性)和致敏(或高反应性)。一般认为耐受是机体自身保护机制的体现，但 反应性过低可使机体防御能力下降。不利于清除病原微生物而导致脓毒败血症；致敏则 可引起炎症火控，是全身炎症反应综合征和多器官功能衰竭的主要原因之一。由于严重 感染时或LPS处理动物或细胞时，机体或白细胞是处于致敏状态还是处于耐受状态各 家报道也不～，我们在查阅、比较文献时注意到诱导自细胞致敏和耐受的条件很相似， 因此推测：致炎因子在相同刺激条件下可能在同一细胞既能诱导致敏义能诱导耐受。采 用反应单一细胞水平的M细胞株，我们检测了LPS预处理后细胞产生各种细胞因子 和活性介质的情况，以证实上述假说。 h后，洗去LPS 方法：巨噬细胞(M)系RAW264．7用LPS(10nglml)预处理O～24 后分别用脂多塘(LPS)、胞壁酰二肽(MDP)、酵母多糖(Zym)、血小板活化因子(PAr)、 h后，用ELISA法检测上清中 甲酰甲硫．亮·脯氨酸(IMLP)及福波酯(PMA)攻击，l～24 NBT还原法检测02一的产生。 结果： 用10 h，或用1000 LPS LPS一次刺激18 ng／ml、100ng／ml和1000ng，ml ng／ml 一次刺激3～24 著增加，增加呈现时间依赖性和剂量依赖性。LPS预处理18h后，再用1000 LPS ng／ml 攻击24 LPS预处理组， h，细胞产生TNF．、NO、IL．6的量均显著低于(p(0．01)未_I{；l 细胞作用的普遍性，我们用另两种M细胞系(J774A．1和P388D1)，在相同条件下检测 了几种主要效应指标，结果显示LPS预处理同样抑制了LPS再次攻击后TNF．、NO 和IL．6的释放．与未用LPS预处理组比较，抑制率分别为70士9％、40a：5％、62a：5％ 再次攻击后IL·l、PLA2和02。的产生，与未用LPS预处理组比较，增加率分别为325士52 均口0．01)。提示LPS诱导M耐受和致敏是普遍现象。 讨论：LPS预处理可同时诱导M细胞对再次LPS或其它刺激因子攻击产生致敏 和耐受两种反应，反应状态与刺激因子和检测的效应指标有关。这种复杂的反应性改变 提示：离开刺激因子和效应指标来判定细胞是处于耐受或致敏状态是没有意义的，也不 能仅根据l～2个指标就认为M处于致敏或耐受状态。 遭受严重损伤的病人常有内源性内毒素的释放入血，因此机体的细胞可能有与体外LPS 预处理相似的反麻性改变。当患者遭受外源性感染时，这些细胞对不同感染因子的产物 发生不同的反应，冈此判断炎症时M处j：致敏或耐受状态应依据不同致病因素区别对 待。有意思的是，对于除LPS外的大多数再次攻击剂，LPS预处理的M表现为NO 利o，：的高反麻性；提示细胞清除病原菌的能力增加，并可能同时损伤自身组织和细胞， 引起多器官衰竭。 19．鳖鱼软骨提取物对肝癌生长的抑制作用研究 孙加红t，沈先荣1，贾福星1，吉冬梅2。任大明2，蒋定文1。王玲‘。储智勇1。王曦 1，霄呈样1．(1海军医学研究所海洋生物研究中心，2复旦大学遗传所，．J博200433) 拥要t东海鲸鲨软骨用盐溶液抽提、丙酮分级沉淀、超滤、分子筛层析等步骤。制备得 剑鲨鱼软骨提取物。采用小鼠H22肝癌模型、人体肝癌QGY肿瘤模型，接种第二天腹腔 注射给药，连续给药8天，观察抑瘤率。结果显示鲨鱼软骨提取物体内对小鼠肝癌H22 腋皮r接种模型的疗效，超高剂量组250mg／kg|v×loqd方案具有45．88％，高剂量组 125 iv×】oqd方案