单嘧磺隆对乙酰乳酸合成酶(ALS)活性影响地研究.pdfVIP

主里些三堂叁查堑主些耋堡垒墨±二星兰盒堡苎墨——：!l二 单嘧磺隆对乙酰乳酸合成酶(ALS)活性影晌的研究 范志金- 钱传范2 李正名。 陈俊鹏1 王玲秀1 赵卫光1 (1．南开大学元素有机化学研究所．元素有机化学国家重点实验室．天津300071) (2、中国农业大学应用化学系．农业部农药化学及农药使用技术重点开放实验室，北京100094 摘要：本文利用3个对单嘧磺隆敏感性不同的玉米品种为材料，研究了离体和活体条件下单嘧磺隆对乙酰 乳酸合成酶(ALS)活性影响的差异，结果发现，单嘧磺隆对不同玉米品种离体ALS的活性影响存在差异． 但对同一自交系玉米离体ALS的影响差异不大．活体条件下，低浓度的单嘧磺隆对ALS酶无抑制作用，高 浓度则具有抑制作用，这一差异与玉米品种的耐药力无相关性． 关键词： 单嘧磺隆： 乙酰乳酸合成酶： 玉米 磺酰脲类超高效除草剂的出现是新农药刨制的里程碑，国际上先后有7家大公司参加 研制，已发表专利超过380篇(其中杜邦占260篇)，覆盖了近1000万个各种可能的化学 结构。已商品化的28个磺酰脲类除草剂品种在杂环部位均含有两个取代基…。南开大学经 系统的研究，发现某些在杂环部位为单一取代基的化合物具有超高效的除草活性，其中单 嘧磺隆正在产业化的进程中。单嘧磺隆化学名称为N．【2t-(4’．甲基)嘧啶基1—2一硝基苯磺酰脲， 已获得中国国家发明专利[2，}．“。该药对双子叶杂草和大部分的单子叶杂草均有较好的除草 disants(L))防效很好[5]，对目前尚无很 效果。尤其对华北地区的难治杂草碱茅(Puccinellia miliaceum 好防治药剂的谷子(Panicum L)地除草也有显著效果。靶标酶的敏感性的差异可 能是作物和杂草之间选择性及不同作物品种之间相对敏感性差异的重要原因。不同的玉米 品种对单嘧磺隆的反应存在差异“】，本文就单嘧磺隆与玉米ALS之间的关系进行了研究。 1．材料与方法 1 1试验材料 1 I．1供试除草剂：单嘧磺隆，农药国家工程研究中心(天津)提供，纯度98．16％。玉米品种： 掖单13，农大108，农大3138，中国农业大学农学系提供。 1．1．2生化试剂和化学试剂 Adenine 黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin (Acetoin)，Fluka产品：丙酮酸钠(Sodium Serum Pyrophosphate)，中国科学院上海生物化学研究所：牛血清白蛋(BovineAlbumin)， 中国科学院东方仪器设备公司生化部：肌酸单钠盐(Creatinemonohydrate)，上海化学试剂站 SandWashedand 分装，中国医药公司北京采购供应站：石英沙(okla／tz clinched)，纯度 99．8％，天津石英钟厂霸州市化工分厂：其它试剂均为国产分析纯。 1．1_3供试仪器 LRH一250—G光照培养箱，广东省医疗器械厂；UV一754紫外可见分光光度计，上海 第三分析仪器厂：SHZ一88一l型台式水浴恒温振荡器，江苏太苍鹿河生化仪器厂；超速冷冻 Rc26 离心机(SorvallPlus)，美国Sorvall公司。 1．2试验方法 I．2．I不同玉米品种对单嘧磺隆的相对敏感性 参照Fan(2000)的方法进行[6】。 1．2．2乙酰乳酸合成酶(ALS)的提取方法 倍于玉米鲜藿的酶提取液，在石英砂中快速研磨后用8层纱布过滤，定容到10I【IL，于25，0009， 者基金资助项目 中国化工学会农药专业委员会第十一届年会论文集 离心30min，上清液弃去，沉淀即为所需的ALS酶。该酶溶于5～lOmL酶溶解液中直接用于活 力的测定。 1．2．3离体乙酰乳酸合成酶(ALS)的测定 嘧磺隆样本溶液，在各管中加入0．5mL酶反应液和04mL酶液，摇匀后在35℃恒温水浴中 5mL 暗反应1h，用0．1mL3