临床标本中影响聚合酶链反应因素.pdfVIP

·18· 发性增厚，导致肾小动脉硬化，肾组织缺血缺氧引起，肾小球 且早于其他尿酶。因此，对肾小管损害的早期诊断有较大价 滤过膜受损。临床表现为尿mAlb在尿中排量增加。本文测值。本文45例糖尿病患者尿蛋白阴性组尿NAG阳性率为 定的85例糖尿病患者中尿mAlb的阳性率为64．6％。尿蛋 37．1％，而尿mAlb联合NAG的检出率为54．2％，见上。 白阴性组尿mAlb含量明显高于对照组，而阳性组又显著高 本文结果提示：糖尿病患者尿常规蛋白阴性与血尿素和 于阴性组。见表1。由表1可知尿mAlb及NAG与糖尿病患 血肌酐正常者并不排除肾脏病理损害的存在，为了早期预防 者的血糖与发病时间呈正相关。NAG是一种位于溶酶体内 和治疗糖尿病肾病，糖尿病患者应在临床肾病出现之前作尿 的酸性水解酶，分子量为14万，肾近曲小管细胞溶酶体内含 微量蛋白和尿NAG的联合检测，及早做到保护肾脏功能的 量最高，当肾近曲小管细胞受损时尿NAG活性显著升高。 一级预防要求。 临床标本中影响聚合酶链反应的因素 杨朝国 范昕建 聚合酶链反应(PCR)技术快速、灵敏、特异，已广泛应用 于医学各个领域，但由于PCR抑制剂等因素导致试验灵敏度 种DNA聚合酶均对血浆IgG非常敏感。为了减轻或消除血 降低或假阴性结果，使诊断PCR的应用受到限制。抑制剂抑 Gold和T1i聚合酶 浆IgG、单克隆IgGl或IgG3对AmpliTaq 制PCR的机制包括于扰细胞裂解、降解或捕获核酸、灭活 DNA聚合酶。本文将就PCR抑制因素及其消除方法进行简 度降到约0．04vg／g才能消除对DyNAzymeEXL、Expand 要介绍。 high fidelity和TaqDNA聚合酶的抑制，但仍可完全抑制Hot 1．PCR抑制因素 Tub、Pwo和Uhrna聚合酶。 1．1血液：血液广泛用作微生物感染、遗传病、血库和法 1．1．3血红蛋白：25出PCR反应液中含Fib25耀，可将 庭分析等的PCR试验样品，但血对PCR有高度抑制作用。 血中的亚铁血红素、血红蛋白(Hb)、卟啉、高浓度白细胞 Taq DNA、白细胞(WBC)内乳铁蛋白、血浆等明显降低或封闭 增产物检出，而DyNAzyme EXL、HotTub、 PCR扩增效率。 II、DyNAwme l和Tli 1．1．1血细胞：PCR反应液中血沉棕黄层(huffycoat)、 rTth、Taq、TfDNA聚合酶均有一定耐受性，在Hb 100．g,借时，仍可扩增出产物。溶血鼠血清比溶血人血清对 m小板浓缩物、血浆或红细胞(RBC)的浓度(v／v)≥0．02％ Gold PCR抑制作用更强，蛋白酶K．酚提取不能消除溶血血清对 Taq DNA聚合酶)全部抑制。 时，均几乎将PCR(Ampli PCR的抑制。 血细胞对PCR的抑制作用主要是血细胞内含物，PCR反应液 1．1．4乳铁蛋白：2591PCR反应液中含乳铁蛋白25ng， 中含0．4％(v／v)RBC提取物、4％(v／v)WnC提取物及0．8％ GoldDNA可将Ampli (