铽-吡哌酸敏化化学发光法的研究与应用.pdfVIP

C-41 械一毗崛酸敏化化学发光法的研究及应用 赵慧表 陈世侣 孙春燕 金林培 (北京师范大学化学系，北京 100875) 关健词:毗味酸 杖 敏化化学发光法 毗呢酸(PipemidicAcid,PPA)是哇咯酮类抗菌消炎药，主要作用于细菌细胞的DNA旋转酶，干扰 DNA的合成而使细菌死亡，对包括绿脓杆菌在内的所有革兰氏阴性菌均有效，毗呢酸与抗生素之间没 有交叉耐药性，口服吸收良好，在体内几乎不被代谢，主要由尿中以原形物排泄，毒性较低。本文把流动 注射和化学发光技术结合起来，建立一种高效快速、高灵敏度的侧定毗呢酸的方法，并对毗呢酸的化学 发光机理做了研究。 1 实验部分 1.1 仪器和试剂 FI-2100型流动注射仪(北京海光仪器公司);BPCL-4型徽弱发光侧f仪(中国科学院生物物理研 究所);毗呱酸(中国药品生物制品检定所)。 1.2 实验方法 将一定体积的PPA标准溶液或样品溶液注人到NazSO,载液中，在混合池中先与Tb混合配位再 与Ce(N)混合，经混合管进人流通池，以徽光侧量仪侧ATb十一PPA-Ce(IV)-SO;一体系的化学发光强 度I.同时测定试剂空白的发光强度 Ip，相对发光强度AI(I一to)与PPA的浓度呈线性关系。 结果与讨论 2.1 仪器及流路参数的选择 实验中固定泵速为60r/min,测得A种溶液的流速分别为:Ce(N):5.9mL/min,Na2SO,:5.0mL/ min,PPA:3.0mL/min,Tb，十:4.8mL/min,所用聚乙烯管的内径为。.8mm，进样体积为55pL,混合 池与流通池之间的管长为20cm时，具有最大的信噪比. 2.2 反应条件的选择 Ce(IV)-SO;-[17和Ce(N)-SO;--PPA都是弱的化学发光体系，Tb(2.0X10-mol·L--)能极大 地的增强Ce(N)-S明--PPA休系化学发光强度。为了防止Ce(1V)水解，在配制Ce(N)溶液时需加人 一定量的硝酸，实验中选择Ce(IV)溶液的浓度为 1.0X1。一molL-,NaiSO3溶液的浓度为7.OX 10-mol·L1, 2.3 工作曲线 在上述最佳条件下，PPA的浓度与化学发光强度在3.0X10--8.0X10-molL-1范围内成线 性关系。检侧限为6.7X10-molL-1。对4.0X10-molL-的PPA标准溶液平行测定11次.相对 标准偏差为3.1%a 2.4 干扰实验 以加人干扰离子或斌形剂对体系发光强度的影响不超过士100a为限，对6.0X10molL-’的 PPA,1000倍的K+,Na,NW ,Ca+,Zn+,Ni+,Al,Mn+,100倍的Pb2+,哪，丙氮酸;10倍的 Co,Fe+;13。倍淀粉、糊精、葡萄精均不干扰侧定。 2.5 分析应用 作县件务择下用T作曲线法测定了片剂中PPA含量，并测定了回收率(见表 1)，回收率在95.7% 108 -106.8%之间，结果令人满意。此方法的灵敏度很高，选择性好，尿样中的杂质对测定无干扰，不必事先 分离，只斋将尿样适当稀释后便可侧定，侧得回收率在97.700^-101.8%之间。 斑 1 片荆中毗眼酸的侧定 侧得值(mg) 加人t 侧得t 回收卒 黔 X士%RSD (X10-mol，I一1) (X10-mol，L-) (%) 屯 0 4.272 106.8 氏 0 8.107 101.3 250 250.3士1.11 捻 0 12.77 106.4 6 1 0 16.43 102.7 加 0 19.14 95.7