放射标记法研究壳聚糖和牛血清白蛋白自组装超薄膜的形成及稳定性.pdfVIP

放射标记法研究壳聚糖与牛血清白蛋白 自组装超薄膜的形成及稳定性+ 鲁从华“，罗传秋，曹维孝 北京大学分子与分子工程学院，北京100871 基片在两种带有相反电荷的聚电解质溶液中交替吸附后，其表面将形成一层致密有序的 超薄膜的自组装(ESA-Electrostatic 出，由于简单易行，从一出现就受到了广大研究者的极大兴趣，有望在生物传感器．膜渗透和 膜分离，非光学器件．表面改性等领域获得广泛的应用。如在生物材料的表面通过自组装技 术形成超薄膜，与传统的改性方法相比，无疑是一项非常重要且方便的改性手段。因为生物 材料在生物体内种植时，是否会被机体视为异物，关键在于机体与材料表面的相互作用．而 与材料的本体性质基本无关。因此利用这种技术．可对生物材料，特别是对那些生物相容性 不好的材料表面改性，同时保持了材料优异的本体性质。如利用牛血清白蛋白(BovineSerum 片及云母上组装形成超薄膜，来改善材料表面的生物相容性和血液相容性，因为BSA在材料 表面的吸附，减少了纤维蛋白原和血小板的吸附与变形，而肝素是天然的最好抗凝血剂。壳 生物降解．且具有独特的抗菌性、金属离子螯台性、促进伤口的愈合等，在药物释放、伤口 愈合材料、污水处理、重金属回收、膜分离等方面已获得应用．然而关于CS与BSA的自组 装研究尚未见报道。本文拟用放射标记法(11qBSA)研究壳聚糖(CS)与牛血清白蛋白(BSA) 在石英片上形成自组装超薄膜．考察不同实验条件，如pH值、分子量、离子强度、第三种浆 电解质对超薄膜的形成及稳定性的影响，并与原子力显微镜的结果相对照。这也有助于进一 步了解天然多糖与生物大分子的相互作用。 经3：l(vⅣ)的浓硫酸与双氧水处理的石英片，交替浸到CS(1．5mg／m1)的醋酸溶液和含 有微量1125．BSA的BSA(11 KH2PO“ 016mg／m1)磷酸缓冲溶液(pH：7．0的PBS，含有0．025moltl 0．06m01,1 白组装循环的次数。超薄膜的稳定性用I％SDS洗脱一定时问后的残罾量来考察。几种不同实 验条件下的结果都表明：前两个循环的BSA平均吸附量远大于以后每个循环吸附量。这是因 为前两个循环形成的超薄膜未完全覆盖石英片的表面．造成具有不均匀电荷分布和不光滑表 面的石英片促进BSA的吸附。且除去前两个循环外，其他循环形成的超薄膜上BSA的吸附量 与自组装循环的次数基本成线性关系，表明CS和BSA在石英片上的组装根成功．当然．实验 条件对超薄膜的形成及稳定性有根大影响：(1)当CS分别椿在pH=l和pH=5．2的醋酸溶液 aed 时，每组装循环构造的超薄膜上BSA的平均吸附量分别是0，070．18增^肼f，显然pH=5．2 的溶液更有利于BSA的吸附．1％SDS的洗脱结果表明该膜的稳定性也高-这是因为已吸附有 CS醋酸溶液中， BSA的超薄膜浸到低于BSA的等电点(isoelectdcpoint，约为屯9)的pH=l 超薄膜上BSA分子的有效负电荷密度减少，导致Cs与BSA的静电相互作用降低，进一步引 起BSA的吸附量减少和膜的稳定性变差：(2)当BSA溶在不同离子强度构溶液(PBS或二 次去离子水)时，BSA在较高离子强度PBS溶液的吸附量较小．但形成的腆更稳定-这与常 见的离子强度对线形聚电解质在膜上的吸附量，以及对所得超薄膜的稳定性影响，刚好相反； +国家自然科学基金资助项目(NO #通讯联系人． (3)考察C S分子量的影响时发现，分子量越小．越有利于BSA的吸附(Mqzl．2X105。M (4)与BSA带有相同电荷的聚苯乙烯磺酸钠(poly(sodium 度为1．8的磺化壳聚糖(su№nated 地抑制了BSA在膜上的吸附，特别是PSS，效果更显著。这是因为PSS是线形的聚负电解质， 也要与带正电荷的壳聚糖作用，减少了BSA作用的机会，且BSA与PSS共存时，PSS能与 BSA发生强相互作用，特别是在键台点II处。这导致了BSA的构象变化和表面有效负电荷和 疏水微区的屏蔽。两方面的结果都促使BSA在超薄膜上的吸