细菌变异与其腐蚀行为的研究.pdfVIP

细菌变异及其腐蚀行为的研究 昊建军欧天雄杜建华 75 32) (河南濮阳中原油田采油二厂45 摘要中原油田污水处理系统经水体改造后，污水pH值的提高(pl[8．o)有效地控制了 细菌(SRB)生长和腐蚀，但随SRB适应性逐渐增强，细菌生长和腐蚀开始出现加速趋势， 本文探讨了已适应碱性环境的SRB对碳钢腐蚀的影响，对SRB经驯化变异后的菌体形貌、 生长规律、腐蚀行为进行了初步研究，为防治SRB提供了理论依据。 关键词sRB细菌变异微生物腐蚀 1前 言 硫酸盐还原菌(SRB)普遍存在于土壤、海水、污水等缺氧环境中。我国大多数油田污 水系统中部含有不同量的SRB，由SRB导致的设备、管线的腐蚀，是石油工业中常见的严 重问题，中原油田通过提高污水pH值(≥8．0)，有效地控制了细菌(SRB)生长和腐蚀。 但随着SRB通过变异逐渐适应碱性环境．现场开始出现了SRB生长繁殖迹象，由其引起的 腐蚀和水质变黑等问题也随之产生，为能有效地控制碱性环境下SRB变异生长，了解其对 设备管线的腐蚀影响，在实验室培养基中对SRB进行驯化实验，研究了SRB对pH值的适应 性、生长规律及其腐蚀行为，为防治SRB提供依据。 2实验条件与方法 2．1SRB菌种：中原油田采油二厂采油一矿、二矿、三矿原始菌种，分别取自污水站 滤前水．将此含菌水经离心分离，培养基富集、提纯、冷藏保存待用。 2．2培养基及培养条件 不同SRB菌种生长曲线测定、驯化、腐蚀试验等所用培养基，采用API—RP38推荐的培 养基和实验条件。其组成如下：乳酸钠4．Omg／L；酵母浸汁1．Omg／L；维生素CO．19／L； a 2．3变异菌种的驯化培育 三个采油矿污水中SRB分离提纯后保存的菌种，在不同pH值条件下SRB的驯化实验。 取已消毒的小口瓶lO个．加入无菌培养基，用lYlNaOH调节pH值．使之从3．O-12．0逐渐 升高．盖好橡皮塞，在37℃下恒温培养，观察并记录SRB的生长情况。将在最高和最低pH 值下获得的SRB保存，并将其作为再一次驯化试验的菌种，重复驯化试验多次，将最后获 得的菌种挎藏作为腐蚀试验的种源。 2．4生长曲线的测定 试验方法：取一定量SRB菌种于小口盐水瓶中，加入灭菌培养基，在37C下恒温活化 培养48小时，观察SRB生长情况。如果SRB生长正常，即可用经过消毒的注射器取出lal 该菌液加入细菌瓶中，并逐级进行稀释，再取出其中第三或第四级细菌瓶中的细菌2ml用 作菌种．取其2ml菌液加入盛满经过灭菌消毒API培养基的盐水瓶中进行恒温培养，用细菌 瓶测定不同时期苗量随时间的变化，绘出SRB生长曲线。 2．5用透射电子显微镜观察原始和变异SRB形貌 一128— 取含细菌的培养基滴于红蜡片上，将铜网覆盖于培养基波滴上．2分钟后取此铜网于烈 的磷钨酸液滴上复染，最后将此铜网置于投射电镜的样品室，观察细菌形貌。 2．6腐蚀产物分析 在厌氧操作箱中，将带产物膜的试片从广口瓶中取出，置于盛有lOOml含有2％戊二醛 的灭菌培养基的烧杯中，活化8小时，取出样品，用逐级上升的酒精系列脱水(50、70、80、 85、90、95％的酒精系列中各10分钟，loO％的酒精中30分钟)。然后取出样品，放于真空 干燥器中低温干燥，保存备用。 将干燥好的样品表面镀一层金膜，以作扫描电镜(SEM)分析。 2．7SRB对碳钢腐蚀试验 取1000ml广口瓶，带钩橡皮塞，API培养基，己打磨、清洗、干燥恒重的A3钢片，硫 酸亚铁铵等分别进行高温消毒或紫外消毒后，将试片挂入已知Fe2+含量的API培养基中， 密闭后放入37C的恒温培养箱中，培养14天，取出试片后，刷去表面腐蚀产物后，用加 有缓蚀剂的IO％HCl溶液浸泡2-3分钟，然后用6N的NaOH中和，冲洗后干燥，置于干燥箱 中恒重24小时，称重，计算其腐蚀速率。 3 实验结果与讨