紫球藻（Porphyridium+cruentum）原生质体（球）分离的研究.pdfVIP

生产翻备技术与制剂研究论文 全国第六届工业生化学术会议(1999，福建)论文集 紫球藻(Porphyridium 王明兹庄惠如陈皿链绝巧琴吴松刚 (福建师范天学生物工程学院，福州350007 ● 摘妻：长文通过研究影响紫球藻原生质体分离的t要闽亍， 建丑r较为适宜的酶 解体系．试验结果表明：紫球藻细胞壁附着胶顾多糖鞘，一般水解酶难以渗透及降解 。取培养4天处于对救生长期的紫球藻细隐，经】一3％BCh预处理后、使细胞壁外的 多糖鞘变性． 再，硝1．8％(W^7)纤维索酶+1．2％{W，V)果胶酶组成的混合水解璃 液(磷酸盐缓冲波配制)，在28～30．C下缓慢振荡酶水解细胞壁，4h后原生质体分 离率可达56％． 关键词：紫球藻，原生质体，分离，BCh cruentum)是一种单细胞细藻，富含多槠、蛋白质肢高水饱和脂肪 紫球藻(Porphyridium J 簸。 PUFAj、特刖是．f‘碳五烯醺(EPA1』花 是较商医用．镍健价值的高度ji饱和脂肪酸f 生四烯酸(AA)的极好来源，Sf起人nJ的广泛关注”= ● 原生质体足进行生理研究与遗传育种的良女f刺料，Clement 07 用纤维素酶和果胶酶的混台液对分离紫球藻躲生质体进fr』’研究，f{={他m肺喇酶解渴度凡高f ℃)，而且处理过夜，难以获得育种可用的活性恩，}硬体SivanA．”引}H纲菌产7t胞外酏机拦 液分离了原生质体，但跛法复杂，酶的质帚fi王水稳定，不埸推fL府Hj书_迁利用埸蚴商品晦l纤 维素酶+果艘酶)，通过预处理，酶解条件温和，提商紫球藻原生磺体福性、 为阡催遗传育种水 备 8 1材料与方法”7 (略)。 2结果与分析 2．1水解酶的选择 参考高等植物与其他微生物原生质体制备力注， 试验，一些水解酶常用浓度对紫球藻细胞壁 ● 的水解作用。 察．酶组合及细胞壁水解试验结果见表1．紫球藻细胞瞳主要成分是硫酸哺多糖， 由本糖、半乳 糖、葡萄糖及衙萄糖醛酸等组成。 常用水解酶单一一作用效果差，仅果胶酶能水解紫球藻缃胞瞳． 如果胶酶中加入纤维素酶或蜗牛酶可健进藻细胞擘水解， 纤维素酶的效果更佳，原生质体形成率 可达13．3％．进一步试验了它们之闶的复台比例段最适浓度。结果见表2和图1 —‘348— 生产制备技术与制贵甘研究论文 全国第六届工业生化学术会议C1999．福建)论文集 表1水解酶对紫球藻细聪壁作用效墨 ———_水—塑一一． 壁皇垦笠彤成翠j“) 水解酶 原乍质体形成翠(％) ①纤维索酶 O ①+③ 0 @果胶酶 3 1 @+④ 0 @蜗牛酶 0 @+④ 67 ④溶菌酶 0 @+④